本文關(guān)鍵詞：香煙煙霧對哮喘氣道炎癥與氣道重塑的影響和糖皮質(zhì)激素的干預(yù)作用的研究

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【摘要】：目的：用卵清蛋白（OVA）法復(fù)制慢性哮喘小鼠模型，通過香煙煙霧暴露和吸入性糖皮質(zhì)激素（ICS）的干預(yù)，觀察小鼠氣道病理學(xué)特點及瘦素(Leptin)、磷酸化的信號調(diào)節(jié)激酶（P-ERK）的水平變化，探討香煙煙霧暴露對哮喘氣道炎癥與重塑的影響及ICS的干預(yù)作用。方法：40只雄性小鼠隨機分為對照組（A組）、哮喘組（B組）、煙霧暴露組（C組）、布地奈德組（D組）及煙霧暴露布地奈德組（E組），每組8只。B組小鼠在第1、8、15天腹腔注射抗原混合液0.2ml(含OVA20ug和氫氧化鋁2mg)。第21日開始超聲霧化吸入2.5％的OVA生理鹽水激發(fā)，隔日霧化1次，每次30min，持續(xù)至第52日，共計13次。C組在B組基礎(chǔ)上，自激發(fā)開始前1小時，每日給予小鼠煙霧暴露30min，共燃燒6支香煙；D組在B組基礎(chǔ)上，于每次激發(fā)前30min霧化吸入布地奈德1mg；E組在C組基礎(chǔ)上，于每次煙霧暴露后激發(fā)前霧化吸入布地奈德1mg；A組小鼠于第1、8、15天腹腔內(nèi)注射生理鹽水，第21日開始用生理鹽水霧化，頻率和次數(shù)同前。于末次激發(fā)后6小時處死小鼠，結(jié)扎右肺，左肺行肺泡灌洗作細胞分類計數(shù)，取右肺組織行蘇木精-伊紅(HE)染色觀察肺組織病理學(xué)的改變及檢測氣道壁和氣道平滑肌厚度，Masson染色觀察氣道膠原沉積，免疫組化檢測Leptin及P-ERK的表達。RT-PCR檢測Leptin mRNA在肺組織中表達。結(jié)果：（1）行為學(xué)改變：B及D組在激發(fā)時點頭運動、行動遲緩及懶動等呼吸困難等表現(xiàn)；C及E組在煙霧暴露時，煩躁不安、跳躍、口唇發(fā)紺，腹肌痙攣等呼吸困難等表現(xiàn)更加明顯。A組小鼠呼吸平穩(wěn)、反應(yīng)靈敏、無呼吸急促等表現(xiàn)。(2)肺泡灌洗液炎癥細胞檢測結(jié)果：B組炎癥細胞總數(shù)(28.08±1.78)、嗜酸性粒細胞數(shù)(4.17±0.15)及淋巴細胞數(shù)(17.87±0.54)較A組(10.9±0.72、0.88±0.17、3.38±0.32)增多，C組(39.19±2.54、13.72±0.74、20.94±0.83)較B組增多，D組(18.21±0.52、2.17±0.21、14.34±0.55)較B組減少，E組(29.31±1.25、9.89±1.17、18.75±0.35)較C組減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.05）。（3）病理學(xué)特點：B組氣道周圍見大量的炎性細胞浸潤、氣道上皮細胞脫落、黏膜下水腫、氣道平滑肌增厚、管腔狹窄等病理改變；C組較B組更為明顯；D組炎癥浸潤較B組減少，E組炎癥浸潤較C組減少。對照組未見上述變化。肺組織病理學(xué)評分示：B組(4.0±0.28)較A組(0.3±0.14)增多，C組(4.4±0.28)較B組增多，D組(3.2±0.10)較B組減少，E組(4.1±0.17)較C組減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。（4）氣道壁及平滑肌厚度：B組氣道壁及平滑肌厚度(7.91±0.56、5.34±0.84)較A組(3.28±0.49、1.89±0.52)增高，C組(11.16±0.53、8.80±0.84)較B組增高,D組(7.18±0.72、4.22±0.98)較B組減低，E組(10.83±0.54、8.08±0.53)較C組減低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(5)氣道上皮下膠原沉積結(jié)果：Masson染色見，B組(5.23±0.55)較A組(1.58±0.09)增多，C組(6.53±0.68)較B組增多，D組(4.12±0.63)較B組減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)，E組(6.39±0.57)較C組減少，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。(6)Leptin及P-ERK表達：B組Leptin和P-ERK灰度值(OD值)(1.81±0.04、1.77±0.16)高于A組(0.80±0.07、0.39±0.16)，C組(2.17±0.08、2.33±0.27)高于B組，D組(1.46±0.09、1.44±0.14)較B組減少，E組(1.90±0.11、2.09±0.36)較C組減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。（7）Leptin mRNA結(jié)果：B組(5.12±1.73)高于A組(2.25±1.31)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），C組(6.03±1.80)表達量高于B組，D組(4.36±0.45)較B組減少，，E組(5.78±1.20)較C組減少，但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。（8）相關(guān)性分析：各組小鼠Leptin及P-ERK表達呈正相關(guān)(r=0.913,P0.05)；氣道壁、平滑肌厚度及膠原沉積與Leptin及P-ERK表達量呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為Leptin(r=0.526;0.322;0.543,P0.05)及P-ERK(r=0.565;0.366;0.606, P0.05)。結(jié)論(1)用OVA法成功建立了慢性哮喘小鼠模型。(2)煙霧暴露可誘導(dǎo)及加重哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑。(3)Leptin及P-ERK在哮喘小鼠氣道重塑中高表達,并可能參與了哮喘氣道炎癥及氣道重塑的病理生理過程。(4)吸入性糖皮質(zhì)激素可一定程度抑制煙霧暴露哮喘小鼠氣道炎癥及重塑，其機制可能與吸入性糖皮質(zhì)激素下調(diào)Leptin及P-ERK的表達有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：煙霧暴露 哮喘 瘦素 細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 氣道重塑 吸入性糖皮質(zhì)激素
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 前言12-14
• 材料和方法14-26
• 結(jié)果26-32
• 討論32-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻37-41
• 附圖41-43
• 英漢縮略詞對照表43-44
• 致謝44-45
• 文獻綜述：瘦素與哮喘的研究進展45-56
• 參考文獻53-56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 周明,季學(xué)楓;瘦素的研究進展(綜述)[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2003年02期

2 鄔楠;瘦素受體的分子生物學(xué)研究進展[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2004年02期

3 李健;郭雪君;徐衛(wèi)國;;難治性哮喘發(fā)病機制研究進展[J];國際呼吸雜志;2006年01期

4 沈華浩;應(yīng)英華;;新版全球哮喘防治創(chuàng)議(GINA)方案的評價和解讀[J];臨床內(nèi)科雜志;2007年04期

5 曾佳;熊瑛;賈曉琴;;孟魯司特對哮喘大鼠瘦素、STAT3及IL-6含量的影響[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年01期

本文編號：584957