目的：構(gòu)建人白細(xì)胞介素10(hIL-10)的原核表達(dá)載體，應(yīng)用 大腸桿菌表達(dá)hIL-10，并加以純化，應(yīng)用于小鼠氣道過敏性炎癥反 應(yīng)模型，研究外源性重組人白細(xì)胞介素10(rhIL-10)在過敏性炎癥中 的作用。 方法：抽取健康成人外周血，分離得到外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)， 應(yīng)用刀豆素A(Con-A)刺激培養(yǎng)24小時(shí)，然后抽提細(xì)胞總RNA。通 過RT-PCR方法擴(kuò)增hIL-10cDNA，將hIL-10cDNA定向克隆于原 核表達(dá)載體pBAD/gⅢA，應(yīng)用PCR方法、酶切分析和序列測(cè)定篩選 鑒定陽(yáng)性克隆。培養(yǎng)篩選出的陽(yáng)性克隆，應(yīng)用阿拉伯糖誘導(dǎo)表達(dá) hIL-10，并進(jìn)行初步純化。實(shí)驗(yàn)小鼠霧化吸入誘導(dǎo)表達(dá)的rhIL-10， 觀察其在小鼠氣道過敏性炎癥中的作用。實(shí)驗(yàn)小鼠分為3 組，皆于 第1、10天腹腔內(nèi)注射20μg雞卵蛋白加2mg的Al(OH)₃，并于第22、 23、24天作如下處理：預(yù)防組，致敏前24小時(shí)和05小時(shí)分別吸入 rhIL-10(10ng)；治療組，致敏后20分鐘吸入rhIL-10(10ng)，對(duì) 照組，致敏后20分鐘吸入PBS 2ml。對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠...

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前 言
第一部分 人白細(xì)胞介素10原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)
第二部分 rhIL-10對(duì)小鼠氣道過敏性炎癥的作用研究
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致 謝



本文編號(hào)：3963771