目的: 嚴(yán)重感染膿毒血癥仍然是導(dǎo)致急性肺損傷最重要和常見(jiàn)的原因,目前尚缺乏十分有效的治療手段。本研究旨在觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)在脂多糖(LPS)誘發(fā)的大鼠急性肺損傷肺組織中的植入和分布,以及MSC對(duì)LPS致大鼠急性肺損傷的生物學(xué)作用和可能的機(jī)制,為干細(xì)胞治療急性肺損傷提供實(shí)驗(yàn)線索。 方法和結(jié)果: 1.大鼠骨髓MSC的分離培養(yǎng)和鑒定 采用密度梯度離心和全骨髓貼壁分離法均能成功分離純化雄性大鼠骨髓MSC,P₄代細(xì)胞呈均一的長(zhǎng)條形、梭形等成纖維細(xì)胞樣特征性形態(tài),流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志呈CD34^-/CD45^-/CD90⁺,并具有成骨、成脂肪分化潛能。 2.雄性MSC在雌性大鼠肺組織中的植入 制備雄性大鼠性別決定基因(Sry)探針,應(yīng)用熒光原位雜交(FISH)技術(shù)觀察靜脈注入雄性MSC后,雄性MSC在雌性大鼠肺組織中的植入。結(jié)果顯示給予LPS和生理鹽水(NS)組沒(méi)有檢測(cè)到呈sry基因陽(yáng)性的細(xì)胞,給予NS和MSC組僅在6h和1d發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性細(xì)胞,給予LPS和MSC組直到3w仍有陽(yáng)性細(xì)胞,陽(yáng)性細(xì)胞存在于肺...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.2APO代細(xì)胞形態(tài)(熒光顯微鏡x100)

外周細(xì)胞逐漸稀疏，呈放射狀分布，細(xì)胞集落大小不等。10一14d后，細(xì)胞密度進(jìn)一步增加，基本鋪滿培養(yǎng)瓶底。總之，原代細(xì)胞以貼壁生長(zhǎng)的梭形細(xì)胞為主，呈集落分布，體積較小，細(xì)胞漿豐富，核漿比例正常。圖1.2A。圖1.2APO代細(xì)胞形態(tài)(熒光顯微鏡x100)P。代細(xì)胞呈小圓形、梭形或....

圖1.ZBP4代細(xì)胞形態(tài)(倒置顯微鏡下x100)

軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博士學(xué)位論文的細(xì)胞增殖速度相似，PZ細(xì)胞約5~7d基本鋪滿培養(yǎng)瓶梭形等成纖維細(xì)胞樣間充質(zhì)干細(xì)胞的特征性形態(tài)。圖1達(dá)到較高的均一性。

圖1.3細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

細(xì)胞在第3一5天生長(zhǎng)較快，至第7天進(jìn)入平臺(tái)期2細(xì)胞生長(zhǎng)曲線大鼠MSC的生長(zhǎng)曲線見(jiàn)圖1.3。培養(yǎng)第1天，細(xì)胞數(shù)量有所減少，第2~3天增長(zhǎng)緩慢，然后細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，至第7天進(jìn)入平臺(tái)期，細(xì)胞數(shù)量

圖1.4MSC表面分子流式分析結(jié)果

軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博士學(xué)位論文增加。兩種分離方法獲得的MSC生長(zhǎng)曲線一致。面分子的表達(dá)細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示，利用PerC。11分離液密度梯度離心和篩選法培養(yǎng)的P;代MSe均表達(dá)eDgo(99.51%、99.23%)，不表、0.21%)和CD34(0.27%、0.19%)，即CD34一/C....

本文編號(hào)：3927179