目的：觀察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)數(shù)量和功能的變化。 方法：共收集2008年9月-2009年4月隨訪的穩(wěn)定期COPD患者20例,診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2007年《慢性阻塞性肺疾病(COPD)診治指南》,同時(shí)選擇20例非COPD者為對(duì)照,均無長期吸煙及被動(dòng)吸煙史,近2月無呼吸系統(tǒng)疾病史,經(jīng)病史詢問、體格檢查、胸部X線攝片、肺通氣功能測(cè)定(包括乙酰甲膽堿激發(fā)試驗(yàn))均未發(fā)現(xiàn)肺部異常。密度梯度法分離外周血的單個(gè)核細(xì)胞,流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)EPCs (CD34+/CD133+/VEGFR-2+細(xì)胞為EPCs),并用添加了生長因子的特異性內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)單個(gè)核細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化、增殖,以細(xì)胞呈“鋪路石”樣形態(tài),結(jié)合FITC-UEA-I并攝取DiI-acLDL雙染色陽性,內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管性血友病因子(vWF)表達(dá)陽性,鑒定為EPCs。通過計(jì)數(shù)貼壁細(xì)胞數(shù)目測(cè)定EPCs的黏附能力,噻唑藍(lán)比色法(MTT法)測(cè)定EPCs的增殖能力,硝酸還原法測(cè)定EPCs分泌NO的能力,免疫印跡法測(cè)定EPCs的內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)及磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合酶(P-eNOS)蛋...

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一章 慢性阻塞性肺疾病患者內(nèi)皮祖細(xì)胞的變化
    1.1 前言
    1.2 材料與研究對(duì)象
    1.3 方法
    1.4 結(jié)果
    1.5 討論
    1.6 結(jié)論
第二章 內(nèi)皮祖細(xì)胞在吸煙所致慢性阻塞性肺疾病小鼠中的作用
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝
攻讀博士學(xué)位期間主要的研究成果



本文編號(hào)：3818235