目的:探討重組人血清白蛋白(HSA)-硫氧還蛋白(Trx)融合蛋白(HSA-Trx)對流感病毒感染所致急性肺損傷(ALI)小鼠的保護作用。方法:利用畢赤酵母表達系統(tǒng)產生基因重組HAS-Trx融合蛋白,PR8(H1N1)流感病毒誘導ALI小鼠模型,設健康對照組、ALI組、ALI+Trx組和ALI+HSA-Trx組,每組10只。收集各組支氣管肺泡灌洗液(BALF),計算細胞總數,測定肺泡中性粒細胞數量,考馬斯亮藍溶液法測定蛋白濃度,ELISA法測定BALF中干擾素γ(IFN-γ)含量。收集肺組織進行蘇木精-伊紅染色,免疫熒光法檢測肺組織誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)和3-硝基酪氨酸(NO₂-Tyr)的表達。收集血漿,使用CR2000RC分析儀測量血漿中過氧化物濃度。結果:HSA-Trx治療顯著降低ALI小鼠BALF中總細胞、中性粒細胞數量和總蛋白的含量(P<0. 05),降低肺組織中8-OHdG和NO₂-Tyr水平和血漿中過氧化物濃度(P<0. 05),但對肺組織iNOS和IFN-γ的表達無顯著抑制效...

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【文章目錄】：
材料和方法
    1 實驗動物
    2 主要試劑
    3 方法
        3.1 HSA-Trx融合蛋白的產生
        3.2 ALI小鼠模型的建立及實驗分組
        3.3 肺灌洗樣本分析
        3.4 肺組織的病理學檢查
        3.5 血漿過氧化物水平的測定
        3.6 肺組織病毒載量測定
        3.7 FITC標記HSA-Trx評價其在流感病毒感染小鼠BALF中的分布
    4 統(tǒng)計學處理
結果
    1 HSA-Trx對流感病毒感染小鼠體重及存活率的影響
    2 HSA-Trx對流感病毒感染小鼠損傷的相對抑制作用
    3 HSA-Trx對BALF中IFN-γ水平及肺中iNOS表達的影響
    4 HSA-Trx對肺組織氧化應激的影響
    5 在流感病毒感染小鼠BALF中FITC標記的HSA-Trx的分布
討論



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