目的:明確不可分型流感嗜血桿菌（NTHi）對支氣管上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響,并初步探討其作用機(jī)制。方法:培養(yǎng)人正常支氣管上皮細(xì)胞BEAS-2B,采用感染復(fù)數(shù)（MOI）=10的NTHi感染BEAS-2B細(xì)胞后,分別采用ELISA和RT-qPCR分別檢測細(xì)胞上清中白細(xì)胞介素8（IL-8）和粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）的表達(dá)水平;Western blot檢測細(xì)胞內(nèi)IκBα含量以及組蛋白去乙酰化水平,并檢測組蛋白脫乙酰酶（HDAC）的表達(dá)以及HDAC的酶活性;電泳遷移率變動分析和染色質(zhì)共沉淀實(shí)驗(yàn)分別測定NF-κB以及IL-8的結(jié)合活性。通過NF-κB以及HDAC抑制劑預(yù)處理細(xì)胞后,檢測細(xì)胞內(nèi)GM-CSF和IL-8的表達(dá)水平。結(jié)果:MOI=10的NTHi感染BEAS-2B細(xì)胞后,細(xì)胞上清中IL-8和GM-CSF含量及其mRNA表達(dá)水平均顯著升高（P<0.05）; NTHi感染可顯著下調(diào)胞漿內(nèi)總IκBα的表達(dá),增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)NF-κB的DNA結(jié)合活性,并顯著誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)組蛋白H3和H4的磷酸乙酰化,促進(jìn)IL-8和RNA聚合酶II的結(jié)合;細(xì)胞內(nèi)HDAC的表達(dá)水平及酶活性也顯著降低（P&... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 菌株與細(xì)胞株
    2 主要實(shí)驗(yàn)材料
    3 主要方法
        3.1 細(xì)胞培養(yǎng)與NTHi感染
        3.2 ELISA檢測細(xì)胞因子
        3.3 RT-qPCR實(shí)驗(yàn)
        3.4 Western blot檢測
        3.5 電泳遷移率變動分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)
        3.6 染色質(zhì)免疫沉淀檢測
        3.7 HDAC活性檢測
    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 NTHi誘導(dǎo)支氣管上皮細(xì)胞表達(dá)IL-8和GM-CSF
    2 NTHi誘導(dǎo)IL-8和GM-CSF分泌與NF-κB有關(guān)
    3 NTHi誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞組蛋白磷酸乙�；�
    4 NTHi下調(diào)BEAS-2B細(xì)胞內(nèi)HDAC表達(dá)與活性
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不可分型流感嗜血桿菌誘導(dǎo)NCI-H292細(xì)胞產(chǎn)生MUC5AC的分子機(jī)制[J]. 陽帆,周麗麗,曹艷華,楊志英,鄺婧,張園園,李堅(jiān).  中國病理生理雜志. 2015(09)
[2]不可分型流感嗜血桿菌通過p38MAPK和NF-κB依賴的方式上調(diào)IL-8的表達(dá)[J]. 徐峰,夏靖燕,楊燕,徐志豪,沈華浩.  中國病理生理雜志. 2009(01)



本文編號：3643860