發(fā)布時間：2022-01-27 06:19

　　目的：sIL-4R蛋白的臨床Ⅰ/Ⅱ期試驗，證實導入外源性的sIL-4R減少糖皮質激素劑量，甚至可用于SRA的治療。但sIL-4R存在純化工藝復雜，且應用劑量大，長期反復應用又容易產(chǎn)生抗sIL-4R抗體等不利因素。為了克服上述缺陷，我們嘗試構建sIL-4R基因腺病毒載體，應用其來基因治療重癥哮喘或SRA。方法：本實驗利用卵蛋白鼻腔滴注的方法，復制出BALB/c小鼠的哮喘模型，采用半定量RT-PCR的方法，檢測地塞米松腹腔內注射后不同時間內IL-4R和sIL-4R mRNA水平的變化；BALB/c小鼠的脾臟細胞懸液與5ng／ml的IL-4共孵育4小時，采用TRIzol一步法提取脾細胞的RNA，RT-巢式PCR獲得小鼠的sIL-4R基因并測序；應用分子克隆技術構建sIL-4R基因腺病毒載體，并經(jīng)脂質體介導與腺病毒骨架載體PJM17共轉染293細胞，獲得重組腺病毒。結果：（l）地塞米松對IL-4Rα mRNA、sIL-4R mRNA的影響地塞米松治療組及陽性對照組哮喘小鼠各時相點肺組織中IL-4Rα mRNA基因條帶與內參β-actin的灰度相對值行各組間及組內相對灰度值t檢驗，結果示p值均大... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市211工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮寫
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前言
材料
第一部分:糖皮質激素對哮喘小鼠肺組織sIL-4受體作用的研究
    方法
    結果
第二部分：sIL-4受體基因的克隆及鑒定
    方法
    結果
第三部分：重組sIL-4R腺病毒載體的構建和包裝
    方法
    結果
討論
小結
"><參考文獻>
致謝
綜述一：激素抵抗型哮喘的發(fā)病機理和治療
綜述二：白介素4受體（IL-4R）與支氣管哮喘
附錄



本文編號：3611937