本文關(guān)鍵詞：百草枯中毒大鼠肺纖維化中DERLIN-1與GRP78的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)降解蛋白1(Derlin-1)和葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)在百草枯(PQ)中毒大鼠肺纖維化中的表達(dá)變化,探討Derlin-1和GRP78在百草枯中毒大鼠的肺纖維化形成過(guò)程中的作用。方法:雄性SD大鼠50只,隨機(jī)分為染毒組(PQ組)40只和對(duì)照組10只,染毒組用濃度為20%的百草枯溶液以1:50的比例用生理鹽水稀釋后,按15mg/kg劑量一次性腹腔注射給藥染毒,對(duì)照組予以等量生理鹽水腹腔注射。染毒組依據(jù)染毒時(shí)間的長(zhǎng)短隨機(jī)分為1D、7D、14D、21D四個(gè)亞組,排除腹腔注射藥物后不符合造模標(biāo)準(zhǔn)和死亡的大鼠,最后于1d、7d、14d和21d各處死動(dòng)物6只取肺組織,而對(duì)照組則在1d全部處死取肺組織,最后隨機(jī)選取6只入實(shí)驗(yàn)。觀察大鼠染毒后的行為學(xué)表現(xiàn),大鼠肺組織大體形態(tài)和計(jì)數(shù)肺系數(shù),行蘇木素一伊紅(HE)染色和Masson染色觀察肺組織中肺泡炎及肺纖維表象,并進(jìn)行程度評(píng)分;利用免疫組化(IH)檢測(cè)大鼠肺組織中GRP78、Derlin-1的表達(dá)變化,酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)檢測(cè)肺組織勻漿中Derlin-1的表達(dá)。結(jié)果:1、一般情況變化:對(duì)照組大鼠精神可、呼吸平穩(wěn)、活動(dòng)自如。染毒組大鼠于染毒后,出現(xiàn)不同程度的精神萎靡、呼吸急促、鼠尾發(fā)紺、蜷縮少動(dòng)、進(jìn)食少等,甚至出現(xiàn)死亡。且上述癥狀于1-7天時(shí)明顯加重,死亡率高;在7-21天時(shí),大鼠精神、進(jìn)食較前緩解,但仍有呼吸困難。2、肺組織大體形態(tài):對(duì)照組大鼠肺組織呈粉紅色,色澤均勻,質(zhì)地柔軟。染毒組出現(xiàn)程度不同的充血、水腫、局灶性肺實(shí)變。肺充血水腫于早期時(shí)明顯,后期主要以實(shí)變、質(zhì)地變硬、纖維化為主。計(jì)數(shù)各組肺系數(shù),1D、7D、14D組肺系數(shù)均高于對(duì)照組(P0.05),7D組最高,而14D和21D組肺系數(shù)與7D比較有所降低(P0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而21D組肺系數(shù)與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、HE染色病理表現(xiàn),肺泡炎程度評(píng)分:正常對(duì)照組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)完整、清晰。染毒組出現(xiàn)充血、水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn),后期出現(xiàn)成纖維細(xì)胞增生、膠原沉積。染毒各亞組肺泡炎評(píng)分均高于對(duì)照組(P0.05)。7D組最高,1D組次之,而21D肺泡炎已緩解明顯。4、Masson染色結(jié)果及肺纖維化程度評(píng)分:對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常。染毒組隨時(shí)間延長(zhǎng)可見(jiàn)逐漸增多的藍(lán)染的膠原纖維沉著,部分實(shí)變、纖維化。染毒各組肺纖維評(píng)分均高于對(duì)照組,7D、14D、21D組與對(duì)照組相比較(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而1D組與對(duì)照組相比(P0.05),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。且隨染毒時(shí)間延長(zhǎng),染毒組各組肺纖維評(píng)分越來(lái)越高。5、肺組織中Derlin-1蛋白表達(dá):免疫組化結(jié)果顯示,Derlin-1主要表達(dá)于支氣管上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿中。Elisa法和免疫組化結(jié)果均提示Derlin-1在正常對(duì)照組中表達(dá)最低,在染毒組的表達(dá)呈先上升后下降的趨勢(shì),于14D組表達(dá)最高,21D組有所下降但仍高于1D和7D。染毒各組與正常組的差異(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6、肺組織中GRP78蛋白表達(dá):結(jié)果顯示,GRP78蛋白主要在支氣管上皮細(xì)胞、肺泡細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中表達(dá)。且在1D組表達(dá)開(kāi)始升高,在7D組達(dá)到最高,14D組開(kāi)始有所下降但仍高于1D組,而21D組較14D下降明顯(P0.05),但染毒組表達(dá)水平均較對(duì)照組高(P0.05),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1、百草枯中毒可成功構(gòu)建大鼠肺纖維化模型。2、百草枯中毒大鼠體內(nèi)出現(xiàn)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)。3、隨著百草枯中毒時(shí)間的延長(zhǎng),肺組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白Derlin-1、GRP78表達(dá)呈規(guī)律性改變。4、Derlin-1與GRP78可能在肺間質(zhì)纖維化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要作用。
【關(guān)鍵詞】：百草枯 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 Derlin-1 GRP78 肺間質(zhì)纖維化
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R563;R595.4
【目錄】：

• 中文摘要3-6
• Abstract6-10
• 前言10-14
• 材料與方法14-22
• 結(jié)果22-32
• 討論32-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-46
• 英漢縮略詞對(duì)照表46-48
• 致謝48-49
• DERLIN-1 與肺部疾病的關(guān)系(綜述)49-60
• 參考文獻(xiàn)56-60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 戴木森;錢欣;;百草枯致肺纖維化的機(jī)制及其治療進(jìn)展[J];創(chuàng)傷與急診電子雜志;2013年01期

  本文關(guān)鍵詞：百草枯中毒大鼠肺纖維化中DERLIN-1與GRP78的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：359345