第一部分:一種改良型小鼠哮喘模型的建立及評(píng)價(jià)哮喘動(dòng)物模型一直是哮喘研究的重要手段和工具,也是本研究的重要基礎(chǔ)和平臺(tái)。為此我們選擇遺傳背景清楚,所需試劑易購(gòu)價(jià)廉的BALB/c小鼠建立哮喘模型。結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道,通過(guò)控制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物條件、改良致敏劑及致敏方法等,摸索出一種新的、效果良好的小鼠哮喘模型建立方法,為后續(xù)研究提供很好的工具和手段。目的:建立一種改良型小鼠哮喘模型并評(píng)價(jià)其效果。方法: SPF級(jí)雌性BALB/c小鼠20只,隨機(jī)分為模型組和對(duì)照組,模型組于第0和14d（腹腔+皮下）注射100μg OVA（卵清蛋白）致敏,第21～30d霧化吸入5% OVA激發(fā),對(duì)照組則用生理鹽水替代。結(jié)果:模型組小鼠在激發(fā)過(guò)程中出現(xiàn)明顯呼吸加深加快,點(diǎn)頭呼吸,安靜少動(dòng),弓背直立,二便失禁等哮喘急性發(fā)作表現(xiàn)。BALF（支氣管肺泡灌洗液）中白細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞分類明顯增多。血清及BALF中IL-4明顯增高,INF-γ降低,OVA特異性IgE增高。肺組織病理切片見(jiàn)細(xì)支氣管及伴行血管周圍有較多炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),嗜酸性粒細(xì)胞聚集,杯狀細(xì)胞增生,粘液分泌增加,平滑肌增生肥厚,部分肺泡間隔斷裂形成肺氣腫。1結(jié)論:通過(guò)對(duì)方法的... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

肺組織病理切片H.E染色（×100）

Control Asthma圖 1-3 BALF 細(xì)胞涂片瑞氏染色（×400）Fig. 1-3 Morphologic assessment of cells in BALF by Wright's stain（×400）注：箭頭所指為嗜酸性粒細(xì)胞*81624324048BCW×（05/ml）1

含 mIL-4RA的重組pMD18-T simple質(zhì)粒進(jìn)行核苷酸序列測(cè)定，結(jié)果顯示pMD18-Tsimple 質(zhì)粒中插入的 mIL-4RA 基因序列與預(yù)期序列完全一致（圖 2-3）。1 2 3500bp400bp300bp圖 2-2 含重組 pMD18-T simple 質(zhì)粒陽(yáng)性菌落 PCR 結(jié)果Fig.2-2 PCR product of recombinant pMD18-T simple positive colonies1 and2：PCR product of positive colonies，3：DNA Marker

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]過(guò)敏性哮喘大鼠模型的制備[J]. 崔龍?zhí)O,楊永清,陳漢平,馬淑蘭,張英英.  上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué). 2000(02)
[2]綠色熒光蛋白及其應(yīng)用[J]. 張峰,任燕,陸長(zhǎng)德.  生命科學(xué). 1999(02)



本文編號(hào)：3587627