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PGRN在小鼠衣原體肺部感染中作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-11-28 19:26
  背景:衣原體(Chlamydia)是一種專性胞內(nèi)寄生及革蘭氏染色陰性原核細(xì)胞型病原微生物,其中包括人類疾病相關(guān)的沙眼衣原體(C.trachomatis,Ct)和肺炎衣原體(C.pneumoniae,Cpn)等。衣原體可以感染人類結(jié)膜、呼吸道上皮以及生殖道粘膜上皮導(dǎo)致結(jié)膜炎和呼吸道、生殖道感染等多種疾病發(fā)生。沙眼衣原體感染呼吸道時(shí)可誘導(dǎo)宿主的免疫應(yīng)答,其中固有免疫和適應(yīng)性免疫均發(fā)揮重要的抗感染作用。體內(nèi)衣原體感染后可激活樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)和巨噬細(xì)胞(macrophages,MΦs)等專職抗原提呈細(xì)胞(antigen presenting cells,APCs)介導(dǎo)的固有免疫細(xì)胞應(yīng)答。樹突狀細(xì)胞作為固有免疫與適應(yīng)性免疫的橋梁,啟動(dòng)并引導(dǎo)T細(xì)胞應(yīng)答,Th1細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子IFN-γ在抗衣原體感染中發(fā)揮關(guān)鍵作用。顆粒蛋白前體(progranulin,PGRN)是一類多功能分泌型生長(zhǎng)因子,在組織修復(fù)和宿主防御中發(fā)揮重要作用。PGRN在快速增殖的上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞、神經(jīng)元中高表達(dá)。已有研究顯示在炎癥性和自身免疫性疾病中PGRN發(fā)揮重要作用,但在感染性... 

【文章來(lái)源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

PGRN在小鼠衣原體肺部感染中作用的研究


圖4.PGRN缺失加速衣原體感染的小鼠體重恢復(fù)并加快衣原體的清除??A.野生型(WT)小鼠和Gm-/-?(KO)小鼠衣原體在感染21天內(nèi),每日固定時(shí)間記錄的??體重變化情況;B.不同感染組不同時(shí)間點(diǎn)肺部載菌量(IFU)的變化情況;*表示與WT組相??比,數(shù)據(jù)為平均值士SEM

衣原體感染,肺組織,小鼠


圖5.衣原體感染的小鼠肺組織H&E染色結(jié)果及組織炎癥評(píng)分??A.野生型(WT)小鼠和GV?_a?(KO)小鼠的肺組織在衣原體感染不同時(shí)期石蠟切片的??H&E染色結(jié)果,代表性視野分別在l〇x和2〇x拍攝;B.對(duì)A圖的H&E染色結(jié)果進(jìn)行組織炎??癥評(píng)分,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;*表示與WT組相比,數(shù)據(jù)為平均值+SEM。*,?P<0.05?(n=6)。??41??

細(xì)胞表面,流式細(xì)胞術(shù),缺失,熒光強(qiáng)度


使用MACS磁珠陰選分離純化野生型(WT)和PGRN基因缺失(K0)小鼠??的CD4+的T細(xì)胞,通過Anti-mouse?CD3e和Anti-mouse?CD28刺激體外模擬TCR??介導(dǎo)的預(yù)活化過程。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其表面早期活化相關(guān)的CD69?(圖12,?A,B)??和活化增殖相關(guān)的CD25?(圖12,?C,D),發(fā)現(xiàn)PGRN缺失對(duì)TCR介導(dǎo)的CD4+T??細(xì)胞預(yù)活化無(wú)顯著影響。CFSE標(biāo)記CD4+T細(xì)胞,并加入衣原體體外刺激6天,??流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)KO組較WT組增殖水平略有升高,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖12,??E,F),因此PGRN缺失對(duì)T細(xì)胞本身的活化和增殖并無(wú)直接影響,暗示了衣原??體感染后體內(nèi)顯著性升高的Thl免疫應(yīng)答反應(yīng)可能由其上游抗原提呈細(xì)胞(APC)??等的異常活化所致。??A?wr?ko?6??5*??CD69??卜?4.??一??—?—?h-?■■?T??r???I???VCD4?m?K0??C?D??WT?KO??CD25?1?loo-,???§1^???0—?i?I?B??i?-?■??02?LU8??S^)?|?????CD4?°?WT?K0??E?F??^?Ctr?Pro??wt?m?|?〇??^M?.11?tm??F ̄一??F ̄——?1° ̄??'--—??s-?CFSE??圖12.?PGRN缺失對(duì)T細(xì)胞活化和增殖無(wú)明顯影響??A,?B.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T細(xì)胞表面CD69的表達(dá)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(n=3);?C,?D.?T細(xì)胞表面??CD25的表達(dá)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(n=3);?E


本文編號(hào):3525009

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