矽肺（Silicosis）是由于長期吸入含游離大量二氧化硅（silicon dioxide,SiO2）的工業(yè)性粉塵所引起的職業(yè)性疾病,以矽結(jié)節(jié)的形成和彌漫性肺間質(zhì)性纖維化為主要病理特點。矽肺纖維化發(fā)生機制復(fù)雜,脫離粉塵環(huán)境后肺纖維化仍繼續(xù)進展,目前尚無有效的治療手段,且缺乏敏感有效的診斷指標(biāo),這些問題給矽肺纖維化的防治工作帶來了極大的困難與挑戰(zhàn)。因此,深入探討矽肺纖維化的發(fā)生、發(fā)展機制及尋找有效的防治靶點一直是職業(yè)病研究領(lǐng)域中的重點、難點任務(wù)。微小RNAs（microRNAs,miRNAs）是一類由內(nèi)源基因編碼的長度約為18-24個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,參與調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等多種生理、病理過程,其是多種疾病的重要發(fā)病機制,也可作為某些疾病潛在的標(biāo)記物。在本研究中,建立了吸入性矽肺大鼠模型,首先采用高通量測序技術(shù)篩選肺組織內(nèi)差異表達的miRNAs,并進行相應(yīng)的生物信息學(xué)分析;其次,對差異變化最為明顯的miRNAs在體內(nèi)外進行驗證,并分析其對Ⅰ型膠原（collage type Ⅰ,Col Ⅰ）和α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：188 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

矽肺大鼠肺組織HE、VG染色形態(tài)圖（×400）

43在對照24周組大鼠肺組織中僅表達于氣管、支氣管及血管周圍平滑肌，而在染塵24周組的肺組織中α-SMA強陽性表達于矽結(jié)節(jié)及周圍間質(zhì)成分中；圖2蛋白質(zhì)免疫印跡（westernblot）實驗結(jié)果顯示，與對照24周組比較，在染塵24周組肺組織中的α-SMA和ColI蛋白的表達量均顯著增高，其分別增高為對照組的10.61倍和2.75倍，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。圖2免疫組織化學(xué)染色法（×400）和蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測矽肺大鼠肺組織中α-SMA和ColI的表達Fig.2Theexpressionofα-SMAandColIinlungtissueofsilicosisratmeasuredbyimmunohistochemicalstaining(×400)andwesternblot2.矽肺大鼠肺組織中差異表達miRNAs的篩選及生物信息學(xué)分析2.1矽肺大鼠肺組織中差異表達的miRNAs高通量測序分析技術(shù)結(jié)果見表3所示，染塵24周組與對照24周組數(shù)據(jù)進行比較，以差異倍數(shù)|log2(foldchange)|≥1且P＜0.05時為組間差異有顯著性，總共獲得有統(tǒng)計學(xué)意義的差異miRNAs為70個；其中與對照組相比，在矽肺組大鼠肺組織中l(wèi)og2(foldchange)＞1為miRNAs表達上調(diào)，表3中顯示表達上調(diào)的miRNAs為41個；同時log2(foldchange)＜-1為miRNAs表達下調(diào)，表3對照24周組（C24W）染塵24周組（S24W）C24WS24Wα-SMA(43KD)Tubulin-α(55KD)ColI(130KD)α-SMA(IHC)

46續(xù)表3NO.miRNA名稱對照組含量矽肺組含量log2(foldchange)P-value61rno-miR-124-3p0.78780-6.29980.01792962rno-miR-4310.82760-6.37090.00086863rno-miR-873-3p0.94940-6.56890.00048364rno-miR-325-3p0.95190-6.57270.0137865rno-miR-137-3p1.04150-6.70250.00033866rno-miR-1193-3p1.04330-6.7050.00030167rno-miR-433-3p1.11450-6.80030.00020568rno-miR-409a-5p1.39190-7.12099.55E-0569rno-miR-370-3p2.51950-7.9771.17E-0670rno-miR-411-3p2.5470-7.99279.76E-072.2矽肺大鼠肺組織中差異表達miRNAs的篩選火山圖與對照24周組比，染塵24周組中差異表達的miRNAs在火山圖中展示（圖3），紅色點表示miRNA表達上調(diào)，綠色點表示miRNA表達下調(diào)，灰色點表示miRNA表達沒有變化。以|log2(foldchange)|≥1為且P＜0.05閾值，在矽肺組大鼠肺組織中共篩選出，表達上調(diào)的miRNA為41個，表達下調(diào)的miRNA為29個。圖3矽肺大鼠肺組織中差異miRNAs的篩選火山圖Fig.3ThedifferentialmiRNAsinlungtissuesofsilicosisratsshowedinVolcanoPlot

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3501692