【背景】慢性阻塞性肺疾�。–OPD）是一種以持續(xù)呼吸癥狀和氣流受限為特征的疾病。煙霧暴露是導(dǎo)致COPD的主要原因。吸煙使患者呼吸系統(tǒng)暴露于有毒顆�；驓怏w,造成的慢性氣流阻塞。COPD的主要病理改變是慢性支氣管炎及肺氣腫,導(dǎo)致該病理表現(xiàn)的原因是氣道及肺組織持續(xù)性炎癥反應(yīng)。針對其炎癥機制從而應(yīng)用有效的抗炎藥物是治療COPD的重點。雖然近年來大量研究明確了糖皮質(zhì)激素在COPD患者中有抑制慢性炎癥反應(yīng)的作用,然而在COPD患者中存在糖皮質(zhì)激素抵抗,從而限制了糖皮質(zhì)激素對COPD患者的治療效果。組蛋白去乙�；�2（HDAC2）和糖皮質(zhì)激素受體α（GR-α）表達失調(diào)是是COPD患者產(chǎn)生糖皮質(zhì)激素抵抗的重要機制。細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）信號通路是絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的重要亞族之一。ERK調(diào)節(jié)包括炎癥在內(nèi)的多種生物學(xué)行為。煙草煙霧提取物（CSE）能夠促進ERK1/2與p-ERK1/2蛋白表達,從而促進呼吸道炎癥性疾病進展。抑制ERK1/2表達可促進U937細胞內(nèi)HDAC2表達。激活的HDAC2作用于GR-α使其去乙�；罨瘡亩种蒲装Y基因的表達,且激活的糖皮質(zhì)激素受體亦可激... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CSE對U937細胞的毒性檢測Figure1.TodetectthedrugtoxicityofCSEtoU937cells

地塞米松磷酸鹽溶液干預(yù) CSE 組（CSE）細胞后，細胞內(nèi) IL-8 表達的抑制率為（4.06±1.45）%。此外，對照組（Con）中，細胞內(nèi) IL-8 表達的抑制率為 50%時地塞米松磷酸鹽溶液的濃度約為 10-8.9mol/L；CSE 組（CSE）中細胞內(nèi) IL-8 表達的抑制率為 50%時地塞米松的濃度約為 10-4.7mol/L。結(jié)果表明：（1）隨著地塞米松濃度的降低，細胞內(nèi) IL-8 表達的抑制率逐漸下降揭示地塞米松抑制 U937 細胞分泌 IL-8，具有抗炎作用；（2）對照組與 CS組相比，在同一濃度地塞米松干預(yù)條件下，CSE 組細胞內(nèi) IL-8 表達的抑制率較對照組低。此外，應(yīng)用 CurveExpert 1.4 版軟件進行 ELISA 結(jié)果數(shù)據(jù)擬合并計算后得出：對照組（Con）中，IL-8 抑制率為 50%時地塞米松的濃度約為 10-9mol/L；CSE 組中，IL-8 抑制率為 50%時地塞米松的濃度約為10-5mol/L。綜上，揭示了 CSE 能夠誘導(dǎo) U937 細胞產(chǎn)生糖皮質(zhì)激素抵抗。

CSE 的 10%FBS 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，12h 后，加入 10ng/ml TNF-α，1h 后，加入 10-9mol/L 地塞米松磷酸鹽溶液，11h 后，收集細胞；CSE 組（CSE）干預(yù)方式為（CSE+10ng/mlTNF-α+10-9mol/L Dex）：以含 0.5%CSE 的 10%FBS 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，12h 后，加入 10ng/ml TNF-α，1h 后，加入 10-9mol/L 地塞米松磷酸鹽溶液，11h 后，收集細胞。Western Blotting 法檢測各組細胞內(nèi) ERK、p-ERK、HDAC2、GR-α、GAPDH 蛋白表達,采用獨立樣本 t 檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果如圖 3 所示， CSE 組（CSE）與對照組（Con）相比，細胞內(nèi) ERK1/2 與 p-ERK1/2 表達顯著增加而 HDAC2 與 GR-α表達顯著減少，表明 CSE 促進 U937 細胞內(nèi) ERK1/2 與 p-ERK1/2 表達，抑制 HDAC2 與 GR-α表達。揭示了 CSE 通過上調(diào) ERK/p-ERK 通路減少 HDAC2 和 GR-α蛋白表達，從而誘導(dǎo)糖皮質(zhì)激素抵抗。


本文編號：3474568