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支氣管哮喘急性發(fā)作時嗜酸粒細胞活化的分子機制研究

發(fā)布時間:2021-11-01 10:04
  研究背景及意義:支氣管哮喘(簡稱哮喘)是一種嚴重危害人類健康的慢性呼吸道疾病,以氣道非特異性炎癥、氣道反應性增高及氣道重建為主要特征。哮喘的發(fā)生與發(fā)展受多種基因的調(diào)控,從而決定淋巴細胞亞型,免疫反應性,嗜酸粒細胞(Eosinophils,EOS)及肥大細胞的遷移、活化、細胞因子合成、粘附分子表達及組織修復過程。盡管哮喘基礎研究取得較大的進步,哮喘的治療更多的還是依賴于糖皮質激素、β2腎上腺素受體激動劑等幾類藥物。評估哮喘的指標仍以肺功能指標、呼出氣一氧化氮及誘導痰EOS為主,因此哮喘臨床診治策略仍有待進一步完善。EOS與哮喘氣道炎癥、免疫調(diào)控、上皮細胞損傷、上皮下基質沉積、氣道阻塞及肺功能下降等密切相關。臨床研究也顯示誘導痰EOS可作為哮喘臨床控制的有效指標。2006年全球哮喘防治創(chuàng)議(Global Initiative for Asthma,GINA)明確指出:EOS可能在哮喘氣道重建過程中發(fā)揮重要作用,而氣道重建很可能是未來哮喘治療的新靶點。足夠證據(jù)表明EOS活化在哮喘發(fā)生發(fā)展中起重要作用,但其活化具體機制尚未完全闡明。近年來也有多項研究觀察到了EOS某些基因... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

支氣管哮喘急性發(fā)作時嗜酸粒細胞活化的分子機制研究


SSH示意圖

電泳圖,姬姆薩染色,瑞士


實驗結果、EOS分離結果經(jīng)全自動全血細胞計數(shù)儀分析及EOS瑞氏一姬姆染色(圖1一3),示,治療前EOS約為7、106個,純度為>95%;治療后EOS總數(shù)度>95%;臺盼藍活力鑒定均大于99%。顯微鏡計數(shù)8xl05個,純圖1一3:EOS瑞士一姬姆薩染色,400xFig.l一3:Wrigt一 GiemsastainingofEOS400x二、總RNA電泳結果分析圖卜4:總RNA電泳圖l:代表Drive:總RNA;2代表Teste;總RNAFig.I一 4Elee

反轉錄,第一,質量


三、 supersMA盯 enNAsynthesisds一enNA合成結果取20ng總RNA進行反轉錄,然后對第一鏈進行純化,并行LD一PcR擴增雙鏈DNA,從圖1一5可以看出,tester在27個循環(huán)達平臺期,drive:組在30個循環(huán)達平臺期。擴增出的EOSds一cDNA均呈Smear擴增,cDNA擴增完整,質量較好。圖1一5:cDNA第二鏈擴增結果泳道 M:l000bpDNAmarker:泳道分別代表15,18,21,2427


本文編號:3469971

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