發(fā)布時間：2021-10-31 10:48

　　目的：目前特發(fā)性肺纖維化發(fā)病機制仍不明確,缺乏有效治療方法。有關肺纖維化發(fā)生過程中基因改變的相關研究逐漸增多,并通過相關基因的研究以尋找新的分子治療靶點。長鏈非編碼RNA作為一類新的非編碼RNA,其調(diào)控機制及與疾病的關系已成為研究熱點。本研究通過觀察博萊霉素誘導的大鼠肺纖維化模型中l(wèi)ncRNA表達譜的變化,分析lncRNA的結構特點、與：mRNA的位置序列關系,最終選擇lncRNA-MRAK088388以及MRAK081523作為進一步研究對象,探索其在肺纖維化發(fā)生中的調(diào)控機制。方法：Sprague-Dawley大鼠隨機分為對照組及模型組,通過氣管內(nèi)注入BLM法建立肺纖維化動物模型,于28 d時處死大鼠留取肺組織,部分置于液氮冷凍,其余組織進行常規(guī)固定-石蠟包埋及戊二醛固定-環(huán)氧樹脂包埋處理。Masson染色和羥脯氨酸堿水解法檢測肺內(nèi)膠原含量的變化,透射電子顯微術觀察肺組織超微結構改變；利用lncRNA芯片技術檢測對照組及模型組肺組織lncRNAs和mRNAs表達譜的改變,進行GO分析及pathway分析,通過NCBI數(shù)據(jù)庫、UCSC數(shù)據(jù)庫等對lncRNA進行生物信息學分析；篩選差異表... 

【文章來源】：濱州醫(yī)學院山東省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．博萊霉素誘導的肺纖維化模型鑒定（Ａ）正常組肺組織超微結構：肺泡上皮??細胞形態(tài)結構完整，肺間隔寬度正常，含少量膠原纖維

為探索ＩｎｃＲＮＡ在肺纖維化的潛在生物學功能，我們通過基因芯片方法檢測??了在博萊霉素誘導的肺纖維化中ＩｎｃＲＮＡ表達譜，此外巧片結果還包含了?ｍＲＮＡ??表達譜。散點圖及聚類分析（圖２）直觀顯示了?ＩｎｃＲＮＡｓ和ｍＲＮＡｓ在不用樣本??中的轉錄表達情況。原始數(shù)據(jù)經(jīng)標準化等處理后，根據(jù)倍數(shù)變化篩選出差異表達??２１??

根據(jù)ＩｎｃＲＮＡ的差異表達倍數(shù)，我們選擇了在模型組中上調(diào)表達較明顯的??ＡＪ００５３９６和Ｓ６９２０６?（表１Ａ）進行原位雜交實驗，檢測它們在肺組織的表達變??化及細胞定位，藍紫色代表基因的陽性表達區(qū)域。結果如圖３所示，模型組中??ＡＪ００５３９６和Ｓ６９２０６的表這均較對照組明顯增加，與巧片表達趨勢一致。同時可??觀察到ＡＪ００５３％和％９２０６主要位于肺間質細胞的胞質中


本文編號：3467993