發(fā)布時間：2021-10-25 07:38

　　目的:觀察煙霧暴露環(huán)境下肺血管Toll樣受體4（TLR4）、核因子-κB（NF-κB）亞基P65蛋白和增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）的表達(dá),探討TLR4及NF-κB信號通路在大鼠肺血管重塑中的可能作用機(jī)制。方法:SPF級健康雄性SD大鼠48只,隨機(jī)分為對照組（control組）、煙霧暴露4周組（S4組）、煙霧暴露8周組（S8組）和煙霧暴露12周組（S12組）,每組各12只。制備煙霧暴露大鼠模型,HE染色法觀察肺血管形態(tài)學(xué)變化,并測量各組大鼠肺血管管壁面積/血管總面積（WA%）和血管壁厚度/血管外徑（WT%）。免疫組織化學(xué)染色法檢測肺血管TLR4、P65和PCNA的表達(dá),蛋白含量用平均積分吸光度來表示。RT-q PCR檢測肺血管TLR4的mRNA表達(dá),并分析各組肺血管WA%、WT%、TLR4蛋白和TLR4 mRNA、P65蛋白、PCNA蛋白與肺血管重塑的相關(guān)性及TLR4蛋白與WA%、WT%、P65蛋白、PCNA蛋白之間的相關(guān)性。結(jié)果:與對照組比,煙霧暴露組大鼠肺血管WA%及WT%都明顯增高,且WA%及WT%與煙霧暴露時間呈正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）;煙霧暴露組肺血管TLR4蛋白、P65... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2016,32(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

各組大鼠肺動脈HE染色圖

Figure2．TheproteinexpressionofTLＲ4，P65andPCNAinthepulmonaryvasculartissuesineachgroup(immunohistochemicalstai-ning，×400)．圖2免疫組化染色觀察各組大鼠肺血管TLＲ4、P65和PCNA蛋白的表達(dá)3各組大鼠肺動脈TLＲ4的mＲNA表達(dá)從表2可見，煙霧暴露組肺血管TLＲ4的mＲNA表達(dá)量均明顯高于對照組，其表達(dá)量與煙霧暴露時間呈正相關(guān)性，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P＜0.05)。討論肺血管重塑的機(jī)制目前仍不太明確，其病理生理實質(zhì)也是血管的慢性炎癥反應(yīng)［8］。吸煙、細(xì)菌感染等是引起肺部慢性炎癥和血管重塑的重要因素，其發(fā)生機(jī)制目前也還不是太明確。本實驗通過建立吸煙大鼠肺血管重塑模型，經(jīng)HE染色觀察到煙霧暴露后各組大鼠肺血管都發(fā)生了不同程度的炎癥浸潤及管壁變形，增厚，管腔狹窄等，以吸煙12周組血管的改變最為明顯，且進(jìn)一步通過計算證實血管重塑的客觀指標(biāo)(WA%和WT%)與煙霧暴露時間呈正相關(guān)性，這與秦艷艷等［9］的實驗結(jié)果是一致的，提示煙霧暴露致使肺血管重塑大鼠模型制備成功，且肺血管重塑的程度隨煙霧暴露時間延長而逐漸加重。TLＲ4在肺內(nèi)肺外廣泛分布，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞炎癥因子合成和分泌、調(diào)控機(jī)體免疫、識別和清除病毒等。近年來研究發(fā)現(xiàn)，TLＲ4還可能在血管重塑中起核心作用，NF-κB作為TLＲ4下游最為重要的轉(zhuǎn)錄子，在TLＲ4與受體結(jié)合后，TLＲ4/NF-κB信號通路激活，啟動血管炎癥反應(yīng)［10］。唐曉敏等［11］發(fā)現(xiàn)TLＲ4通過激活NF-κB信號通路參與血管緊張素-II所致的高血壓大鼠的血管重塑;田剛等［12］發(fā)現(xiàn)COPD患者肺血管中TLＲ4及NF-κB水平明顯高于非COPD組，且發(fā)現(xiàn)其水平與肺血管壁周圍炎癥浸潤程度，肺血管平滑肌細(xì)胞增生程度都呈正相關(guān)性;Yang等［13］研究發(fā)現(xiàn)TLＲ4通過?

。所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，各組間差異顯著性檢驗采用單因素方差分析，各組均數(shù)間的兩兩比較用SNK-q檢驗。相關(guān)性分析采用Pearson法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1HE染色結(jié)果對照組肺部結(jié)構(gòu)大致正常，肺泡較完整，肺動脈管腔較大，血管平滑肌較均勻，管壁較光滑，管壁及周圍較少炎性細(xì)胞浸潤。煙霧暴露組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)都有不同程度破壞，肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡壁變薄或斷裂，肺血管都有不同程度增生，管壁增厚或管腔變形，管壁及周圍可見較多炎性細(xì)胞浸潤，以煙霧暴露12周組改變最為明顯，見圖1。Figure1．PulmonaryvascularmanifestationsofratsineachgroupwithHEstaining(×400)．圖1各組大鼠肺動脈HE染色圖煙霧暴露組肺血管重塑定量分析觀察指標(biāo)(WA%和WT%)都明顯高于對照組，且跟煙霧暴露時間呈正比關(guān)系，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P＜0.05)，見表2。表2各組大鼠肺血管形態(tài)學(xué)定量分析及TLＲ4蛋白、P65蛋白、PCNA蛋白和TLＲ4mＲNA的表達(dá)結(jié)果Table2．Thequantitativeanalysisofthemorphologicalchanges，theproteinexpressionofTLＲ4，P6andPCNA，andthemＲNAexpressionofTLＲ4inthepulmonaryvessels(Mean±SD．n=12)GroupWA%WT%TLＲ4P65PCNATLＲ4mＲNAControl34．16±1．0822．18±1．220．28±0．090．16±0．030．25±0．041．00±0．12S447．75±0．91*40．45±1．09*0．34±0．07*0．27±0．02*0．32±0．05*1．31±0．23*S861．73±1．05*#51．56±1．38*#0．48±0．05*#0．32±0．05*#0．41±0．05*#1．57±0．21*#S1269．84±0．79*#△63．58±1．67*#△0．53±0．06*#△0．45±0．03*#△0．51±0．02*#△3．81±0．68*#△WA%:vascu

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3456946