背景海水淹溺是引起意外性死亡的最常見原因之一。而淹溺后人體吸入海水引起的損傷也會帶來顯著的社會和公共衛(wèi)生問題。急性肺損傷（acute lung injury,ALI）和急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）是海水吸入后導致的最常見的并發(fā)癥。在海水吸入引起的肺損傷中,肺泡上皮和微血管內皮屏障損傷是引起炎細胞以及水腫液滲出和浸潤的基礎形態(tài)改變。而肺泡細胞尤其是肺微血管內皮細胞層在海水刺激下發(fā)生的凋亡又是引起肺泡氣血屏障損傷的重要原因。因此,抑制肺微血管內皮凋亡的發(fā)生和進展在海水吸入性肺損傷的治療中有重要作用。內質網是負責蛋白生物合成和修飾的主要細胞器。當細胞受到損傷因素刺激時,內質網的蛋白合成方式會產生改變,而在受損傷的細胞中蛋白折疊相關的應激反應也隨之產生。內質網應激反應（Endoplasmic reticulum stress,ER stress）能夠誘發(fā)未折疊蛋白反應（unfolded protein response,UPR）。未折疊蛋白反應是細胞的一種自適應反應,而持續(xù)過度的未折疊蛋白反應最終會引起細胞凋亡的發(fā)生。未... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數】：109 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

內質網應激對大鼠海水吸入性肺損傷病理改變、濕干比以及血管通透性的作用圖1-1（A）正常對照組，（B）海水吸入4h組，（C）海水4h+0.5mg/kg4-PBA組，（D）海水4h+1mg/kg4-PBA組，（E）海水4h+5mg/kg4-PBA組

著的磷酸化激活（P<0.001）。另外，值得一提的是，IRE1 下游分子 XBP1s 在正常大鼠肺組織中幾乎沒有表達，而海水的刺激則使其出現(xiàn)了顯著的增加（P<0.001）。而內質網應激抑制劑 4-PBA 預處理后，一系列相關蛋白的表達都出現(xiàn)了不同程度的抑制（P<0.001）。該部分結果說明了在海水吸入性肺損傷中，內質網應激反應起到了關鍵性的作用，且與 JNK 凋亡相關的 IRE1 通路出現(xiàn)了明顯的激活。另外，XBP1s 從無到有的變化也為后續(xù)串聯(lián)基因治療相關的研究提供了依據。

圖 1-3 大鼠海水吸入性肺損傷中內質網應激反應對細胞凋亡的影響圖 1-2 （A）正常對照組，（B）海水吸入 4h 組，（C）海水 4h+5mg/kg 4-PBA 組n=8，***P<0.001vs 正常對照組，###P<0.001vs 海水 4h 組。3.4 大鼠肺微血管內皮細胞（RPMVECs）分離、培養(yǎng)及鑒定為進行后續(xù)的細胞學實驗，我們提取了原代 RPMVECs 細胞。如圖所示，原代分離的 RPMVECs 細胞最初呈現(xiàn)毛細血管樣結構，當原代細胞團聚合后，細胞會呈現(xiàn)出典型的鵝軟石樣的表型（圖 1-4 A）。而原代細胞進行傳代后，二代細胞會呈現(xiàn)出顯著的內皮細胞的表型，即扁平狀細胞。同時傳代細胞中還會有一些緊密均勻排列短梭型或者多角形的細胞（圖 1-4 B）。除了細胞表型觀測外，我們還通過對血管內皮特異性標志物 CD31 進行了免疫熒光染色標記（圖 1-4 C），也說明了 RPMVEC細胞的分離及培養(yǎng)是成功的。


本文編號：3452749