目的探討PI3K/Akt/HIF-1α信號通路在博來霉素（BLM）誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化中的作用機制。方法 56只C57BL/6小鼠隨機分為對照組和實驗組,實驗組通過氣管內(nèi)滴注BLM（2.5 mg/kg）建立肺纖維化模型,對照組在相同條件下氣管內(nèi)滴注等量0.9%氯化鈉溶液。在造模第21 d取小鼠肺組織標本行HE和Masson染色分析肺組織形態(tài)學(xué)變化;運用Ashcroft評分以及檢測羥脯氨酸含量評估肺纖維化程度;Western blot方法檢測PI3K/Akt/HIF-1α信號通路的變化以及肺泡表面活性物質(zhì)（Pro-SPC）蛋白含量;實時定量PCR（RT-PCR）法檢測膠原蛋白3（Collagen3）mRNA表達水平;免疫組織化學(xué)法檢測肺組織內(nèi)Collagen3蛋白和細胞凋亡數(shù)的變化。結(jié)果實驗組與對照組相比,肺泡炎和肺纖維化程度明顯加重,肺組織內(nèi)充填大量炎細胞及纖維病灶。試驗組Ashcroft評分和羥脯氨酸含量均較對照組顯著升高（P<0.05）。同時,PI3K/Akt/HIF-1α信號通路在實驗組肺內(nèi)明顯活化,并伴有Pro-SPC蛋白生成減少,Collagen3蛋白含量及mRNA水平增... 

【文章來源】：中國呼吸與危重監(jiān)護雜志. 2016,15(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料
        1.實驗動物及分組
        2.主要試劑及儀器
    二、方法
        1.博來霉素肺纖維化模型建立
        2.小鼠肺標本HE染色及Ashcroft評分
        3.肺部Masson染色檢測肺部纖維化程度
        4.羥脯氨酸含量的測定
        5.免疫組織化學(xué)檢測
        6.凋亡細胞檢測
        7.Western blot測定PI3K/Akt/HIF-1α信號通路蛋白表達
        8.小鼠肺組織Collagen3 mRNA表達檢測
    三、統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    一、小鼠肺纖維化評價
        1.小鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)變化
        2.小鼠肺纖維化程度評估
    二、PI3K/Akt/HIF-1α 信號通路在小鼠肺纖維化發(fā)病中的作用
        1.PI3K/Akt/HIF-1α信號通路在纖維化肺組織中的表達
        2.肺組織中Collagen3的表達
        3.肺纖維化組織中的細胞凋亡情況
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]博萊霉素誘導(dǎo)小鼠肺纖維化模型的差異基因表達譜分析[J]. 相煒宏,王立鋒,苗運博,傅恩清,金發(fā)光.  中國呼吸與危重監(jiān)護雜志. 2015(03)
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[3]大鼠心肌肥厚中磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶和磷酸化蛋白激酶B蛋白表達與心肌纖維化的關(guān)系[J]. 穆靈敏,閆曉曉,張光謀,郭志坤,馬貴州,冀艷,王文鋒,殷國田.  解剖學(xué)雜志. 2014 (03)
[4]缺氧誘導(dǎo)因子-1α與百草枯中毒致急性肺損傷早期肺纖維化的關(guān)系[J]. 王瑞蘭,唐雪,吳欣,徐榕,俞康龍,徐侃.  中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志. 2012 (04)
[5]缺氧誘導(dǎo)因子1α介導(dǎo)的信號通路在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化中的作用[J]. 唐琳,郭青,張翠翠,劉章鎖,張曉雪.  中華腎臟病雜志. 2011 (03)



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