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煙草提取物通過(guò)TGF-β1/SMAD2通路誘導(dǎo)RLE-6TN細(xì)胞凋亡

發(fā)布時(shí)間:2021-10-15 02:25
  目的:研究煙草提取物(CSE)對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠II型肺泡上皮細(xì)胞的影響并探究其中的潛在機(jī)制。方法:1.體外培養(yǎng)大鼠肺泡上皮RLE-6TN細(xì)胞株24 h后,分別加入0.5%,1.0%和2.0%CSE共培養(yǎng)48 h, Hoechst染色法檢測(cè)煙草提取物對(duì)細(xì)胞核變化的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡率;蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(Transforming Growth Factor-betal,TGF-β1), smad2的表達(dá)量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3裂解片段(Cleaved caspase-3)的活性。2.TGF-β1受體抑制劑(SB431542) 500 nmol·L-1作用RLE-6TN細(xì)胞株24h后,加入2.0%CSE共培養(yǎng)48 h。Western blot分別檢測(cè)Smad2和Cleaved caspase-3的活性。 結(jié)果:1.經(jīng)不同濃度的CSE(0.5%,1.0%,2.0%)作用RLE-6TN細(xì)胞48 h后,經(jīng)Hoechst染色后,各CSE處理組均可見(jiàn)部分凋亡細(xì)胞,胞核發(fā)白、固縮、染色質(zhì)邊集等現(xiàn)象,對(duì)照組細(xì)胞核呈現(xiàn)均勻的淡藍(lán)色熒光。隨機(jī)視野... 

【文章來(lái)源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】:40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

煙草提取物通過(guò)TGF-β1/SMAD2通路誘導(dǎo)RLE-6TN細(xì)胞凋亡


圖1巧光顯微鏡下觀察(4〇0物CSE對(duì)RLE-6TN細(xì)胞核形態(tài)的變化,(J±s,?n=3)

信號(hào)通路,蛋白,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,白及


白及Cleaved?caspase-3蛋白表達(dá)的影響。隨著C化濃度的增力口,TGF-pl、稱酸化??的Smad2?(p-Sma(n^n?Cleaved?caspase-3蛋白的表達(dá)均上調(diào),與對(duì)照組比較差異有??統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f<0.M)。結(jié)果見(jiàn)圖3和附圖3。??1?5-1?control??0?二?T?Eia?0-5%??%?*?;.?B?10%??a?*?"?T?rri?I?CD?2.0%??1?1.0-?.X?*?i?in??S?三??己?;::=?:::=?*?-??A??:二???、??二?巧二??立。C?工::;?1?;?宣??I?:=:?=?::?E?i??芭?i:?1?i?I?與圓??〇.〇11114口11111口戶11114。保??V》、?糸??分?。護(hù)?盧??々?。公??合會(huì)??皆??圖3?WB檢測(cè)TGF-pi/Smad2信號(hào)通路蛋白及Cleaved?caspase-3蛋白表達(dá)量。??注:*表示實(shí)驗(yàn)姐與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。??Fig?3?Pro化in?expression?of?TGF-pl,Smad2?and?Cleaved?caspase-3?was?detected?by?WB????Note:?*?indicated?化過(guò)t?significant?difference?from?化e?experimental?group?vs?control?group

流式細(xì)胞術(shù),附圖,箭頭,對(duì)照組


bSHBBsI??附圖.1巧光顯微鏡下觀察(400倍)CSE對(duì)RLE-6TN細(xì)胞核形態(tài)變化的影注:A:對(duì)照組;B?D康示0.5%,1.0%和2.0%CSE處理姐,箭頭指示洞亡Fig.l?Nuclear?morphology?change?of?CSE-trea化d?RLE-6TN?were?observed?fluorescence?microscope?(400?X)??Note;?A:?control?group;?B??D:?represents?0.5%,?1.0%?and?2.0%?CSE?treatmenarrows?indicated?apoptotic?cells.??


本文編號(hào):3437257

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