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小鼠IL-33干擾RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及其對(duì)吸煙引起的小鼠肺部炎癥的作用

發(fā)布時(shí)間:2021-10-09 05:03
  IL-33(inteleukin 33,IL-33)作為IL-1家族的一員,與其特異性受體ST2結(jié)合,參與固有免疫和獲得性免疫。IL-33主要通過促進(jìn)Th2細(xì)胞免疫反應(yīng),在自身免疫疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等的發(fā)生發(fā)展中起重要的作用。慢性阻塞性肺疾。╟hronic obstructive pulmonary diseases,COPD)是一組以肺實(shí)質(zhì)與小氣道受到病理?yè)p害后,導(dǎo)致慢性不可逆性氣道阻塞、呼氣阻力增加、肺功能不全為共同特點(diǎn)的肺疾病的總稱。吸煙是COPD發(fā)病的重要因素。為了研究IL-33下調(diào)對(duì)相關(guān)炎癥反應(yīng)的影響,本研究應(yīng)用RNA干擾技術(shù)(RNA interference, RNAi)特異性下調(diào)小鼠IL-33 mRNA和蛋白的表達(dá),探討IL-33下調(diào)在吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性肺炎模型中的作用。研究?jī)?nèi)容如下:一、根據(jù)GenBank中小鼠IL-33 mRNA序列(AY905582),按照RNA干擾序列設(shè)計(jì)原則,運(yùn)用GenScript公司的siRNA design center siRNA Target Finder設(shè)計(jì)針對(duì)小鼠IL-33的小干擾RNA(small i... 

【文章來源】:汕頭大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

小鼠IL-33干擾RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及其對(duì)吸煙引起的小鼠肺部炎癥的作用


shRNA序列設(shè)計(jì)

質(zhì)粒圖譜,篩選基因,潮霉素,綠色熒光蛋白


圖2-3 pRNATin-H1.4質(zhì)粒圖譜Figure 2-3 Schematric structure of pRNATin-H1.4/RetroATin-H1.4/Retro,是 GenScript 公司專門設(shè)計(jì)的 siRNA 逆0.5 μl,與 100 μl DH5α 感受態(tài)細(xì)胞混 H1.4 啟動(dòng)子用于 siRNA 表達(dá)的啟動(dòng),shRNA 可以從酶切位點(diǎn)另帶有潮霉素 B 篩選基因,綠色熒光蛋白(coral grP)用于跟蹤質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn) PT67 的情況。:RNATin-H1.4/Retro15

酶切圖譜,酶切鑒定,酶切圖譜,菌落


pRNATin-H1.4/Retro酶切鑒定(XhoI/BamHI)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]ST2作為Th2細(xì)胞亞群標(biāo)志以及其與支氣管哮喘的關(guān)系的研究[J]. 鞏芷娟,李偉毅,陳廣潔,席曄斌,王保國(guó),周光炎.  上海免疫學(xué)雜志. 2002(02)



本文編號(hào):3425687

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