目的:探討環(huán)氧合酶2（Cyclooxygenase 2,COX-2）對于香煙提取物（Cigarette Smoking Extract,CSE）所誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞凋亡的影響。方法:體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細胞株（ECV-304）,取指數(shù)生長期細胞用于實驗。一支去過濾嘴燃燒的香煙由負壓吸引驅(qū)動裝置連續(xù)抽吸,吸入煙霧,經(jīng)三通管的一個出口入無血清1640培養(yǎng)液中制成懸液,過濾除菌,并稀釋成含不同濃度CSE的1640培養(yǎng)基,1 h內(nèi)用于實驗。整個實驗分為三個部分:1.內(nèi)皮細胞培養(yǎng),按照CSE的干預(yù)濃度不同,將實驗分成四組,即對照組、0.5%CSE干預(yù)組、1%CSE干預(yù)組、5%CSE干預(yù)組。各組細胞培養(yǎng)12h后,采用Hoechst染色法和流式細胞術(shù)檢測細胞的凋亡情況,免疫細胞化學(xué)和Western Blot法檢測COX-2的蛋白表達。2.根據(jù)上一步實驗的結(jié)果,選取5%CSE為干預(yù)點,分別干預(yù)血管內(nèi)皮細胞0小時、3小時、6小時、9小時、12小時、24小時后,采用流式細胞術(shù)檢測細胞的凋亡情況,Western Blot法檢測COX-2的蛋白表達。3.綜合前兩步實驗的結(jié)果,用5%CSE和不同濃度的選擇性COX-2... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 材料與主要儀器
    2.2 方法
    2.3 統(tǒng)計學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 CSE對人血管內(nèi)皮細胞凋亡的影響
    3.2 CSE對人血管內(nèi)皮細胞上COX-2蛋白表達的影響
第四章 討論
    4.1 吸煙所誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞凋亡與COPD
    4.2 環(huán)氧合酶2與COPD的發(fā)病
    4.3 環(huán)氧合酶2對內(nèi)皮細胞凋亡的影響及可能存在的機制
第五章 結(jié)論
第六章 參考文獻
第七章 附錄
綜述
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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