目的:探討環(huán)氧合酶2（Cyclooxygenase 2,COX-2）對(duì)于香煙提取物（Cigarette Smoking Extract,CSE）所誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響。方法:體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細(xì)胞株（ECV-304）,取指數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。一支去過(guò)濾嘴燃燒的香煙由負(fù)壓吸引驅(qū)動(dòng)裝置連續(xù)抽吸,吸入煙霧,經(jīng)三通管的一個(gè)出口入無(wú)血清1640培養(yǎng)液中制成懸液,過(guò)濾除菌,并稀釋成含不同濃度CSE的1640培養(yǎng)基,1 h內(nèi)用于實(shí)驗(yàn)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)分為三個(gè)部分:1.內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng),按照CSE的干預(yù)濃度不同,將實(shí)驗(yàn)分成四組,即對(duì)照組、0.5%CSE干預(yù)組、1%CSE干預(yù)組、5%CSE干預(yù)組。各組細(xì)胞培養(yǎng)12h后,采用Hoechst染色法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況,免疫細(xì)胞化學(xué)和Western Blot法檢測(cè)COX-2的蛋白表達(dá)。2.根據(jù)上一步實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,選取5%CSE為干預(yù)點(diǎn),分別干預(yù)血管內(nèi)皮細(xì)胞0小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、9小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)后,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況,Western Blot法檢測(cè)COX-2的蛋白表達(dá)。3.綜合前兩步實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,用5%CSE和不同濃度的選擇性COX-2... 

【文章來(lái)源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 材料與主要儀器
    2.2 方法
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 CSE對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響
    3.2 CSE對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞上COX-2蛋白表達(dá)的影響
第四章 討論
    4.1 吸煙所誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡與COPD
    4.2 環(huán)氧合酶2與COPD的發(fā)病
    4.3 環(huán)氧合酶2對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響及可能存在的機(jī)制
第五章 結(jié)論
第六章 參考文獻(xiàn)
第七章 附錄
綜述
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腺病毒介導(dǎo)MnSOD基因轉(zhuǎn)染對(duì)香煙煙霧提取物致內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡的影響[J]. 曹蔚,陳平,蔡珊,張程,陳劍波,吳杰.  中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志. 2007(06)
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本文編號(hào)：3412274