發(fā)布時間：2021-09-08 13:05

　　目的:初步研究E3泛素連接酶NEDD4L（neural precursor cell expressed developmentally downregulated gene 4-like）對小鼠樹突狀細胞（dendritic cells,DCs）亞群和功能以及DCs誘導的Th1/Th2分化的影響,進而揭示NEDD4L分子在樹突狀細胞和過敏性肺炎中的作用。方法:1.采用Cre-Loxp重組酶系統(tǒng),建立DCs特異性敲除NEDD4L小鼠模型。將NEDD4L^f/f小鼠（C57BL/6背景）與CD11c-Cre^+/-小鼠（C57BL/6背景）進行雜交繁育,運用聚合酶鏈式反應（PCR）技術鑒定其子代小鼠基因型,篩選出DCs特異性敲除NEDD4L的小鼠(KO,CD11c-Cre^+/-NEDD4L^f/f)和同窩野生型對照小鼠(WT,CD11c-Cre^-/-NEDD4L^f/f)。2.采用流式細胞術檢測WT和KO型小鼠脾臟中DCs和cDCs亞群比例變化以及CD11c

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

NEDD4家族E3泛素連接酶結構圖

圖4.1 DCs特異性敲除NEDD4L小鼠模型的建立和鑒定結果（A）小鼠繁育模式圖 （B）CD11c-Cre及NEDD4L Loxp基因型鑒定結果（C）BMDCs中NEDD4L表達水平Figure 4.1 The establishment and identification of mouse model of NEDD4L specific knockoutin DCs. （A）The pattern diagram of mouse breeding （B）The genotype identification of CD11c-creand NEDD4L loxp （C）The expression of NEDD4L in BMDCs.4.2 DCs 中缺失 NEDD4L 不影響脾臟 DCs 群體、外周 CD4+T 與 CD8+T細胞的比例以及 DCs 表面膜分子表達脾和黏膜相關淋巴組織是人體重要的外周免疫器官和組織，而DCs是機體中功能

圖 4.3 DCs 中缺失 NEDD4L 對炎癥因子分泌的影響（A）BMDCs 中炎癥因子 mRNA 水平 （B）BMDCs 培養(yǎng)上清中 IL-4 蛋白水平Figure 4.3 The effects of deletion of NEDD4L in DCs on secretion of inflammatory cytokines（A）The mRNAtranscription levels of inflammatory cytokines in BMDCs （B）The IL-4 protein levein culture supernatant of BMDCs. The representative data are one of three independent assays. Data armean ±SEM. NS，no significant difference，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001.4.4 DCs 中缺失 NEDD4L 不影響 BMDCs 激活的抗原特異性 CD4+T 細胞增殖，但促其向 Th2 分化4.4.1 BMDCs 與 OT-II 小鼠 CD4+T 細胞共培養(yǎng)DCs 的主要功能是攝取、加工處理和呈遞抗原。當 DCs 遇到外源性抗原時，DC


本文編號：3390837