研究目的 近年研究發(fā)現(xiàn),某些細(xì)胞因子基因多態(tài)性與矽肺易感性密切相關(guān)。編碼細(xì)胞因子的基因多態(tài)性通過影響轉(zhuǎn)錄造成其表達(dá)量的差異,從而影響矽肺的發(fā)生和嚴(yán)重程度,也造成了矽肺發(fā)病的個體差異。腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-1（IL-1）是目前研究較多的細(xì)胞因子,對SiO2粉塵引起的呼吸道炎癥和進(jìn)行性纖維化起重要作用,其基因多態(tài)性影響細(xì)胞因子的表達(dá)產(chǎn)量和矽肺的嚴(yán)重程度。本研究欲對中國矽肺患者TNF-α、IL-1RA（IL-1的一個亞型）基因多態(tài)性分布進(jìn)行研究,揭示其基因多態(tài)性與中國漢族人矽肺易感性的相關(guān)性,為進(jìn)一步闡明TNF-α、IL-1RA基因多態(tài)性在矽肺發(fā)病中的作用提供重要的遺傳學(xué)資料,以期能更好地保護(hù)矽肺易感人群的健康。 對象與方法 在中國西南地區(qū)某鋼鐵集團(tuán)公司隨機(jī)抽取自愿合作的矽塵接觸工人212名,其中有75例矽肺患者（Ⅰ期44例、Ⅱ期23例、Ⅲ期8例）作為病例組,137名無矽肺的矽塵接觸者作為對照組。所有研究對象均來自某鋼鐵集團(tuán)公司有確切矽塵接觸史、職業(yè)史和作業(yè)環(huán)境相似的人群,均為男性漢族,彼此無血緣關(guān)系,無免疫系統(tǒng)疾病和其他重大疾病。對所有研究對象拍攝高仟伏X射線后前... 

【文章來源】：四川大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

TNF一a一308位點PcR一RELP片段質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的瓊脂糖凝膠電泳圖

循環(huán)15次后，再于72℃延伸smni;PCR擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后，短暫離心，置于4℃保存?zhèn)溆�。常�?guī)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果如圖9，目的條帶清晰，且沒有雜帶，說明引物設(shè)計合成無誤，即可進(jìn)行內(nèi)側(cè)引物實時熒光定量PCR擴(kuò)增。

(3)根據(jù)熒光定量PCR測定Ct值對IL一IAR+2018多態(tài)位點進(jìn)行基因分型熒光定量PRC的擴(kuò)增曲線可以分為三個階段:熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期階段。在熒光信號背景階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，我們無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物己經(jīng)不再呈指數(shù)增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板之間沒有線性關(guān)系，所以用終產(chǎn)物量不能計算出起始模板的量。為了定量和比較的方便，在定量PRC中引入了三個非常重要的概念:熒光基線、熒光闡值和Ct值�；�是指PRC循環(huán)開始時，雖然熒光信號累積，但仍在儀器可以檢測的靈敏度下�；�范圍的定義是從三個循環(huán)開始起到Ct值前的第三個循環(huán)止。熒光閉值的確定是3一S1個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。Ct值的定義是:每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達(dá)到設(shè)定的閡值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)�？梢奀t值取決于閩值，而闡值取決于基線，基線取決于實驗的質(zhì)量，因此Ct值是一個完全客觀的參數(shù)。根據(jù)PRC的基本原理可

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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