目的：了解香煙煙霧提取物（CSE）是否誘導(dǎo)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HPMEC）凋亡以及CSE濃度和干預(yù)時間對HPMEC凋亡的影響。探究CSE干預(yù)是否影響HPMEC中血管內(nèi)皮生長因子及其受體2（VEGFA/VEGFR2）在轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)層面的表達,從而推測CSE可能通過VEGF/VEGFR2表達下調(diào)機制引起HPMEC凋亡參與慢性阻塞性肺疾病（COPD）的發(fā)生發(fā)展過程。方法：體外培養(yǎng)HPMEC予不同濃度CSE干預(yù)及相同濃度CSE干預(yù)不同時間長度后檢測細(xì)胞凋亡以比較不同組間凋亡率。篩選出最佳干預(yù)濃度和干預(yù)時間長度后檢測CSE干預(yù)后HPMEC中VEGF/VEGFR2mRNA和蛋白質(zhì)表達較非干預(yù)組是否存在差異。全部數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行分析,顯著性水平取a=0.05。結(jié)果：不同濃度CSE（0%,0.5%,1%,2.5%,5%,10%）干預(yù)HPMEC均引起凋亡率高于對照組（P<0.01）,且上述各組間兩兩比較有顯著差異（P<0.01）,除0.5%CSE干預(yù)組外,上述其余各組HPMEC壞死率明顯高于對照組且各組間兩兩比較有顯著差異（P<0.01）；相同濃度CSE（1%）干預(yù)... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
縮略詞表
第一章 前言
第二章 對象、材料與方法
    2.1 研究對象
    2.2 主要設(shè)備和試劑
        2.2.1 主要實驗儀器與器材
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要實驗用溶液配制
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 香煙煙霧提取物(CSE)的制備
        2.3.3 細(xì)胞分組
        2.3.4 雙染法檢測細(xì)胞凋亡
        2.3.5 實時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR,RT-PCR)檢測mRNA的表達
        2.3.6 Western Blot檢測VEGF/VEGFR2蛋白質(zhì)的表達
    2.4 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    3.1 CSE干預(yù)對HPMEC凋亡的影響
        3.1.1 不同濃度CSE對HPMEC凋亡的影響
        3.1.2 CSE干預(yù)不同時間對HPMEC凋亡的影響
    3.2 CSE干預(yù)對HPMEC VEGF/VEGFR2 mRNA表達的影響
    3.3 CSE干預(yù)對HPMEC VEGF/VEGFR2蛋白質(zhì)表達的影響
第四章 討論
    4.1 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.1.1 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的提取
        4.1.2 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的純化
        4.1.3 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長于纖維粘連蛋白的關(guān)系
    4.2 CSE對內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡的影響
        4.2.1 內(nèi)皮細(xì)胞凋亡機制
        4.2.2 內(nèi)皮細(xì)胞凋亡與臨床疾病
        4.2.3 內(nèi)皮細(xì)胞凋亡與吸煙的關(guān)系
    4.3 CSE對內(nèi)皮細(xì)胞的VEGF/VEGFR2 mRNA表達的影響
    4.4 CSE對HPMEC中VEGF/VEGFR2蛋白質(zhì)表達的影響
        4.4.1 VEGF/VEGFR2與吸煙、COPD的關(guān)系
        4.4.2 VEGF/VEGFR2在吸煙或COPD患者中降低的可能機制
第五章 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Epithelial Cell Apoptosis and Lung Remodeling[J]. Kazuyoshi Kuwano.  Cellular & Molecular Immunology. 2007(06)



本文編號：3352183