目的使用屋塵螨提取物（HDM）建立中性粒細胞為主型小鼠哮喘模型。方法按照隨機數(shù)字表法,將16只無特定病原體（SPF）級BALB/c小鼠分為對照組和模型組。模型組給予HDM滴鼻致敏及激發(fā),對照組小鼠給予等量生理鹽水。末次激發(fā)后24 h,采用BUXCO小鼠無創(chuàng)肺功能儀測量氣道呼氣間歇（Penh）值確定氣道阻力,收集支氣管肺泡灌洗液（BALF）計數(shù)細胞數(shù)并進行炎細胞分類, HE染色觀察肺組織炎細胞浸潤程度。實時定量PCR檢測白細胞介素6（IL-6）、 IL-17F、 IL-1βmRNA表達,微量樣本多指標流式蛋白定量技術(shù)（CBA）檢測BALF中IL-4、 IL-6、 IL-17F、腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平。結(jié)果與對照組相比,模型組Penh值明顯升高,氣管及血管旁炎癥比對照組明顯加重;模型組小鼠IL-6、 IL-17F、 IL-1βmRNA水平增加, BALF細胞數(shù)及中性粒細胞數(shù)明顯增加, BALF中促中性粒細胞型細胞因子IL-6、 IL-17F、 TNF-α水平明顯升高。結(jié)論成功建立了中性粒細胞為主型塵螨過敏小鼠哮喘模型。 

【文章來源】：細胞與分子免疫學雜志. 2020,36(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

哮喘模型造模方法

末次激發(fā)后24 h檢測氣道阻力, 采用(0、 3.125、 6.25、 12.5、 25、 50)mg/mL Ach激發(fā), BUXCO 小鼠無創(chuàng)肺功能儀測量對應的Penh值。小鼠放入腔體適應5 min, 霧化相應劑量Ach 2 min, 記錄數(shù)據(jù)3 min, 休息1 min, 所得每組各劑量數(shù)據(jù)取平均值。對照組和模型組Penh值隨Ach劑量升高而逐漸升高, 模型組Ach的劑量從3.125 mg/mL至50 mg/mL 升高的幅度明顯大于對照組, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05, 圖2), 說明模型組小鼠氣道阻力明顯增加。2.2 BALF總細胞數(shù)和中性粒細胞和嗜酸性粒細胞百分比明顯增加

將制備好的切片放入一般光學顯微鏡400倍下觀察, 可見模型組小鼠氣管及血管旁有大量炎性細胞浸潤, 以中性粒細胞、 嗜酸性粒細胞、 單核細胞為主; 可見支氣管黏膜皺襞延長增多, 平滑肌增厚, 部分管腔縮窄伴炎細胞和液體滲出。部分肺泡破裂融合。對照組氣管及血管旁未見明顯炎細胞浸潤, 未見平滑肌增生, 肺泡正常(圖4)。2.4 模型組小鼠肺組織IL-6、 IL-1β、 IL-17F mRNA水平增加

【參考文獻】：
期刊論文
[1]模擬臨床的中性粒細胞性激素抵抗型支氣管哮喘小鼠模型的建立及意義[J]. 王楠,陳子,葛林陽,王曦,高蕾,李濤,胡蓉,張明順,周林福.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2020(01)
[2]Effect of Gubenfangxiao decoction on respiratory syncytial virus-induced asthma and expression of asthma susceptibility gene orosomucoid 1-like protein 3 in mice[J]. Huang Zhengguang,Gao Lijuan,Zhao Xia,Ling Hao,Chen Wenjun.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2016(01)
[3]屋塵螨提取液在BALB/c小鼠氣道炎癥中的作用[J]. 趙敏,范秋淋,孫奮勇,陳春球,李智.  同濟大學學報(醫(yī)學版). 2015(01)



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