目的課題組之前的研究已證實(shí)在OVA誘導(dǎo)的哮喘小鼠模型中,烏司他丁通過抑制ROS的產(chǎn)生、誘導(dǎo)抗氧化酶的表達(dá),起到治療哮喘的作用,但具體機(jī)制尚不清晰;此研究將以Nrf2/HO-1這一氧化應(yīng)激的關(guān)鍵通路為切入點(diǎn),深入探討烏司他丁抗氧化作用的潛在機(jī)制。方法建立OVA誘導(dǎo)的小鼠哮喘模型,腹腔注射烏司他�。�100 k U·kg-1·d-1）進(jìn)行治療,對(duì)照組用PBS（p H 7.4）代替;檢測(cè)氣道高反應(yīng)性;ELISA法檢測(cè)小鼠BALF中IL-4、IFN-γ、總Ig E及特異性Ig E的表達(dá)水平;雙氫羅丹明（DHR）-123方法檢測(cè)小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）細(xì)胞中ROS含量;檢測(cè)小鼠肺組織中蛋白羰基含量（protein carbonyl）和丙二醛（MDA）水平;抗氧化酶試劑盒檢測(cè)小鼠BALF中的抗氧化酶;Western blot及Real-time PCR檢測(cè)小鼠肺組織中HO-1在蛋白和基因的表達(dá)水平;Western blot、IF及EMSA檢測(cè)Nrf2核轉(zhuǎn)移及結(jié)合活性。結(jié)果烏司他丁治療組明顯降低氣道高反應(yīng);降低BALF中IL-4、特異性Ig E及ROS的表達(dá)水平,降低小鼠肺組織Protein ... 

【文章來源】：中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2014,30(12)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及材料
    1.2 方法
        1.2.1 模型建立及分組
        1.2.2 小鼠氣道反應(yīng)性的測(cè)定
        1.2.3 支氣管肺泡灌洗液 (BALF) 的采集
        1.2.4肺組織的采集
        1.2.5 小鼠BALF中細(xì)胞因子及總Ig E和OVA特異性Ig E的檢測(cè)
        1.2.6 小鼠BALF細(xì)胞中ROS的檢測(cè)
        1.2.7 小鼠肺組織中Protein carbonyl content和MDA水平的檢測(cè)
        1.2.8 小鼠BALF中SOD、GSH和TAOC活性的檢測(cè)
        1.2.9 Western blot檢測(cè)肺組織蛋白中HO-1及Nrf2的表達(dá)
        1.2.1 0 Immunofluorescence (IF)
        1.2.1 1 EMSA檢測(cè)肺組織Nrf2的結(jié)合活性
        1.2.1 2 Real-time PCR檢測(cè)肺組織mRNA中HO-1的表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 小鼠氣道反應(yīng)性變化
    2.2 UTI抑制OVA致敏小鼠BALF中總Ig E和OVA特異性Ig E的表達(dá)
    2.3 UTI抑制OVA誘導(dǎo)的Th1/Th2因子失衡
    2.4 UTI抑制OVA誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激
    2.5 UTI的治療作用被HO-1的抑制劑Znpp逆轉(zhuǎn)
    2.6 UTI在蛋白水平上誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)且具有時(shí)間和劑量依賴性
    2.7 UTI誘導(dǎo)Nrf2的核轉(zhuǎn)移
    2.8 UTI增強(qiáng)Nrf2與ARE的結(jié)合活性并上調(diào)HO-1在基因水平的表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)導(dǎo)血紅素氧合酶-1蛋白減輕腦缺血/再灌注沙土鼠海馬神經(jīng)元的損傷[J]. 萬曉紅,王雁,趙國(guó)良,陳華梅,邵建林.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2014(05)
[2]Ulinastatin for acute lung injury and acute respiratory distress syndrome: A systematic review and meta-analysis[J]. Yu-Xin Leng,Shu-Guang Yang,Ya-Han Song,Xi Zhu,Gai-Qi Yao.  World Journal of Critical Care Medicine. 2014(01)
[3]糖皮質(zhì)激素對(duì)哮喘大鼠肺組織IL-8表達(dá)的抑制作用[J]. 范曉云,汪浩,徐軻,唐偉,陸兆雙.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2013(02)
[4]支氣管哮喘小鼠模型應(yīng)用評(píng)價(jià)[J]. 沈華浩,王蘋莉.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2005(04)



本文編號(hào)：3337940