黏液是分布于氣道表面、由上皮杯狀細(xì)胞和黏膜下腺細(xì)胞分泌的一層彈性凝膠,主要是由水和黏蛋白組成,而黏蛋白又以黏蛋白5AC（MUC5AC）最重要。黏蛋白在維持氣道濕化、上皮細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面發(fā)揮重要作用,也是呼吸系統(tǒng)抵御外界刺激的非特異性屏障。但在某些條件下,如病原體感染以及吸煙等,可促進(jìn)黏蛋白分泌。細(xì)菌感染是氣道黏液高分泌的常見原因。研究表明,肺炎支原體感染后,可上調(diào)氣道上皮細(xì)胞分泌MUC5AC,從而參與支氣管哮喘以及慢性阻塞性肺疾�。–OPD）的急性發(fā)作,但迄今為止其機(jī)制尚未明了。本研究旨在明確支原體巨噬細(xì)胞活化脂肽-2（MALP-2）上調(diào)氣道上皮細(xì)胞黏蛋白MUCSAC表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。本研究首先體外培養(yǎng)人氣道上皮細(xì)胞NCI-H292,采用MALP-2刺激后,ELISA和實(shí)時定量PCR檢測MUC5AC的分泌以及mRNA表達(dá)水平;同時采用ELISA檢測基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）以及轉(zhuǎn)化生長因子-α（TGF-α）的分泌情況;Western blot分析表皮生長因子受體（EGFR）的磷酸化。最后分別采用EGFR和MMP-9抑制劑,以及TGF-α中和抗體預(yù)處理細(xì)胞,觀察其對MUC5AC分泌... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
第2章 材料和方法
    2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 細(xì)胞株
    2.3 實(shí)驗(yàn)主要試劑
    2.4 主要抗體
    2.5 其他
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
    3.2 MALP-2 刺激實(shí)驗(yàn)
    3.3 Western Blot檢測EGFR磷酸化
    3.4 ELISA檢測MMP-9，MUC5AC和TGF-α的分泌
    3.5 實(shí)時定量PCR檢測MUC5AC mRNA表達(dá)
    3.6 統(tǒng)計學(xué)分析
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 MALP-2 誘導(dǎo)NCI-H292細(xì)胞分泌MUC5AC
    4.2 MALP-2 誘導(dǎo)NCI-H292細(xì)胞表達(dá)MUC5AC mRNA
    4.3 MALP-2 誘導(dǎo)MUC5AC與MMP-9 有關(guān)
    4.4 MALP-2 誘導(dǎo)NCI-H292細(xì)胞分泌TGF-α
    4.5 EGFR調(diào)控MUC5AC分泌
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 黏蛋白在呼吸道感染中的作用
    參考文獻(xiàn)
科研成果
資助基金
致謝



本文編號：3335095