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HR通過MMP-9/p38信號(hào)通路減少小鼠模型痰液和黏蛋白MUC5AC表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2021-08-06 16:48
  [目的]急性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病與支氣管哮喘是常見的呼吸系統(tǒng)疾病,這些疾病常表現(xiàn)為咳嗽、痰多、喘息等癥狀。HR是一個(gè)復(fù)方制劑,臨床應(yīng)用證明它是一個(gè)很有效的鎮(zhèn)咳祛痰藥物,藥效學(xué)研究提示它有很強(qiáng)的鎮(zhèn)咳作用,但它是否有祛痰作用及其作用機(jī)制尚不清楚,本文重點(diǎn)研究它在祛痰方面的作用及其機(jī)制。[方法]1.首先采用常規(guī)的簡(jiǎn)易祛痰模型小鼠氣道酚紅排泄試驗(yàn),評(píng)價(jià)HR是否具有祛痰作用。2.建立內(nèi)毒素脂多糖(LPS)誘導(dǎo)誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型:模型建立后,①氣道內(nèi)滴入碳墨,評(píng)價(jià)HR對(duì)模型小鼠氣道碳墨的清除能力;②采用咔唑比色法測(cè)定灌洗液中的黏多糖,評(píng)價(jià)HR能否減少模型小鼠氣道黏液黏多糖含量;③采用real-time PCR法測(cè)定肺組織中MUC5AC mRNA的表達(dá)和ELISA法檢測(cè)灌洗液中的MUC5AC的蛋白含量,觀察HR對(duì)黏蛋白MUC5AC mRNA表達(dá)與蛋白水平的影響。3.建立卵白蛋白(OVA)誘導(dǎo)的小鼠哮喘模型:模型建立后,①取肺進(jìn)行病理切片,PAS染色,觀察HR對(duì)黏液分泌細(xì)胞氣道杯狀細(xì)胞增生的影響;②采用real-time PCR法測(cè)定肺組織中MUC5AC mRNA的表達(dá),觀察HR對(duì)黏蛋白M... 

【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說明
前言
1. 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
2. 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 藥物配制
    2.2 墨汁配備
    2.3 小鼠氣道酚紅排泄試驗(yàn)
    2.4 LPS誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型
        2.4.1 HR對(duì)LPS誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除功能的影響
        2.4.2 HR對(duì)LPS誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型黏液黏多糖分泌、MUC5ACmRNA與蛋白表達(dá)的影響
    2.5 OVA致敏的小鼠哮喘模型
    2.6 吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型
        2.6.1 HR對(duì)吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除功能的影響
        2.6.2 HR對(duì)吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型黏液黏多糖分泌、MUC5ACmRNA與蛋白以及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    2.7 咔唑比色法測(cè)定BALF中黏液黏多糖含量
    2.8 ELISA法檢測(cè)BALF中MUC5AC蛋白含量
    2.9 肺組織總RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
    2.10 小鼠肺組織石蠟包埋切片
    2.11 過碘酸—Schiff氏(PAS)染色
    2.12 SABC免疫組化
3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 墨汁中碳粒直徑
    4.2 HR對(duì)小鼠氣道酚紅排泄的促進(jìn)作用
    4.3 HR增強(qiáng)LPS誘導(dǎo)的小鼠氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除能力
    4.4 HR抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型BALF中黏液黏多糖分泌
    4.5 HR抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型BALF中MUC5AC的表達(dá)
    4.6 HR抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型肺組織MUC5AC mRNA表達(dá)
    4.7 HR抑制OVA致敏的小鼠哮喘模型肺組織中杯狀細(xì)胞增生
    4.8 HR抑制OVA致敏的小鼠哮喘模型肺組織MUC5AC mRNA的表達(dá)
    4.9 HR增強(qiáng)吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除能力
    4.10 HR抑制吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型氣道黏液黏多糖分泌
    4.11 HR抑制吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型MUC5AC的蛋白表達(dá)
    4.12 HR抑制吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型MUC5AC mRNA表達(dá)
    4.13 HR抑制吸煙誘導(dǎo)的小鼠急性氣管炎模型MMP-9與p-p38蛋白表達(dá)
討論與小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MUC5AC EXPRESSION UP-REGULATION GOBLET CELL HYPERPLASIA IN THE AIRWAY OF PATIENTS WITH CHRONIC OBSTRUCTIVE PULMONARY DISEASE[J]. Rui Ma1*, Ying Wang2, Gang Cheng3, Hui-zhen Zhang2, Huan-ying Wan1, and Shao-guang Huang1 1Department of Respiratory, Ruijin Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200025 2Institute of Immunology, Shanghai Second Medical Universitry, Shanghai 200025 3Department of Pathology, Chest Hospital, Shanghai 200030.  Chinese Medical Sciences Journal. 2005(03)
[2]杯狀細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 史玉蘭,段相林.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2001(04)



本文編號(hào):3326132

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