RNA干擾沉默肺泡巨噬細(xì)胞MD-2對(duì)脂多糖所致大鼠急性肺損傷的影響背景和目的急性肺損傷（acute lung injury, ALI）的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,但多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)以及效應(yīng)細(xì)胞共同參與的、過(guò)度失控的炎癥反應(yīng)是發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。由于炎癥反應(yīng)的環(huán)節(jié)眾多、過(guò)程復(fù)雜,難以選擇有效的靶點(diǎn),故缺乏有效的抗炎治療方法,ALI的病死率仍相當(dāng)高。致病因子參與的炎癥反應(yīng)的上游環(huán)節(jié)則簡(jiǎn)單得多,可能會(huì)成為防治過(guò)度炎癥反應(yīng)的靶點(diǎn)。脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）是革蘭陰性桿菌的主要致病成分,是導(dǎo)致ALI的重要致病因素。LPS由Toll樣受體4（Toll like receptor 4, TLR4）及髓樣分化蛋白-2（myeloid differentiation protein 2, MD-2）組成的復(fù)合受體介導(dǎo)跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),并通過(guò)激活效應(yīng)細(xì)胞內(nèi)的一系列下游信號(hào)分子,引起細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的大量釋放。MD-2在識(shí)別LPS和輔助TLR4將LPS信號(hào)轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程中起到核心作用。本研究探討MD-2在LPS所致大鼠ALI中的作用,以及RNA干擾沉默肺泡巨噬細(xì)胞MD-2基因?qū)PS/TL... 

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【部分圖文】：

LPS信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑示意圖

界刺激反應(yīng)減弱，部分大鼠口鼻有紅色泡沫樣液體溢出。LPS組大鼠的肺組織W心為5.59士0.25，對(duì)照組大鼠的肺組織W心為4.23士0.19，前者顯著增高(t=9.607，P<0.ol)。圖1一l劃蘭\O將磁黔洲咬滲-KLPS組對(duì)照組圖1一1、大鼠肺組織濕/干比值注:*與對(duì)照組比較，P<0.ol，n=5二、肺組織病理形態(tài)學(xué)改變1、大體觀察:對(duì)照組大鼠肺臟外觀色澤粉紅，表面未見(jiàn)損傷病灶，包膜光滑，彈性好，切面干凈;LPS組大鼠肺臟體積增大，色澤暗紅，可見(jiàn)包膜下點(diǎn)、片狀癖血和出血點(diǎn)，臟層胸膜張力較高，切面疏松濕潤(rùn)，有淡紅色液體溢出。2、光鏡下觀察:肺組織石蠟切片HE染色顯示，對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整，肺泡腔清晰，腔內(nèi)無(wú)滲液，肺泡壁光滑，肺泡和肺間質(zhì)無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)(照片1一IA、ZA、3A)。

對(duì)提取的細(xì)胞總RNA經(jīng)紫外分光光度計(jì)測(cè)定 A260/A280為 1.8一2.0，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后可見(jiàn)285和 185區(qū)帶，說(shuō)明所提取的RNA純度高，完整性好。圖1一2圖1一2、細(xì)胞總RNA電泳圖2)半定量Rl’ -PCR檢測(cè)MD一 2mRNA表達(dá):半定量Rl’ -pcR結(jié)果顯示MD一2基因的擴(kuò)增產(chǎn)物為 133bp(內(nèi)參p一actin基因擴(kuò)增產(chǎn)物為4O0bp)處唯一的擴(kuò)增條帶，說(shuō)明目的基因PcR產(chǎn)物特異性良好。圖1一3

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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