目的：（1）建立一種骨髓間充質(zhì)干細胞（Bone marrow mesenchymal stemcells, MSCs）的體外分離純化、擴增的方法，探討MSCs向平滑肌細胞誘導分化的可行性。（2）體外探討CXCR4/CXCR7在SDF-1誘導MSCs增殖和遷移中的作用及與磷脂酰肌醇3激酶（Phosphoinositide3-kinase, PI3K）/核因子-κB（Nuclear factor kappa B，NF-κB）信號通路的關(guān)系，為后期整體動物實驗提供實驗依據(jù)。方法：（1）全骨髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)、鑒定MSCs，利用血小板源性生長因子-BB（Platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB）和轉(zhuǎn)化生長因子β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）進行聯(lián)合誘導，誘導期間觀察細胞形態(tài)變化，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）檢測平滑肌細胞特異性標記α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA）、鈣調(diào)蛋白（calponin）、平滑肌鈣結(jié)合相關(guān)蛋白（smooth muscle22α, SM... 

【文章來源】：桂林醫(yī)學院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞細胞形態(tài)學觀察×200AB

圖 2 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞表面標志物表達Fig2 Surface marker expression of rat bone marrow mesenchymal stem cellsA：FITC-isotype；B：FITC-CD11b；C：FITC-CD44；D：PE-isotype；E：PE-CD45；F：PE-CD1062.2.2 MSCs 體外多向分化潛能MSCs 成骨誘導 4 周行茜素紅染色，鏡下可見橘紅色鈣結(jié)節(jié)；成脂誘導 2周行油紅 O 染色，鏡下可見橘紅色脂滴，見圖 3。A B

4 誘導后的骨髓間充質(zhì)干細胞呈“峰-谷”狀 Bone marrow mesenchymal stem cells showed “peshape after induced by PDGF-BB and TGF-β1for 1 a-SMA、SM22a、Calponin 和 SM-示：經(jīng) PDGF-BB 和 TGF-β1聯(lián)合誘細胞表型標記物 a-SMA、SM22a、，見圖 5 和表 1。和未誘導組 a-SMA、SM22a、Calponin 和 SM-MH of mRNA expression of a-SMA、SM22a et al in tha-SMA/GAPDH SM22a/GAPDH Calponi0.4411±0.08710.8744±0.1104*0.4633±0.10741.0333±0.2062*0.10670.4611

【參考文獻】：
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本文編號：3309881