目的:研究慢性阻塞性肺疾�。–OPD）大鼠模型骨骼肌萎縮中肌細(xì)胞凋亡的參與情況,并通過(guò)測(cè)定幾種關(guān)鍵的Caspase蛋白酶的表達(dá)來(lái)推斷可能的凋亡信號(hào)傳導(dǎo)途徑。方法:通過(guò)被動(dòng)吸煙和氣道注射豬胰彈性蛋白酶（PPE）建立COPD大鼠模型。從體重基本正常的COPD陽(yáng)性大鼠中隨機(jī)選取18只為COPD營(yíng)養(yǎng)正常組（B組）,從體重明顯較輕的COPD陽(yáng)性大鼠中隨機(jī)選取18只COPD營(yíng)養(yǎng)不良組（C組）,另外選18只正常大鼠做為對(duì)照組進(jìn)行研究。取三組大鼠的趾長(zhǎng)伸肌和膈肌分別做成病理標(biāo)本,用TdT介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記（TUNEL）法和免疫組化法分別測(cè)定DNA碎片和評(píng)價(jià)Caspase-3、-8、-9在這些標(biāo)本中的活性表達(dá)。結(jié)果:用TUNEL法和Caspase-3免疫組化法測(cè)得的COPD營(yíng)養(yǎng)不良組大鼠模型骨骼肌細(xì)胞的凋亡率分別是53.9%和44.4%,兩種檢測(cè)方法有較好的一致性（r=0.923）;趾長(zhǎng)伸肌重量是骨骼肌萎縮的一個(gè)穩(wěn)定的指標(biāo),其與凋亡率呈明顯的負(fù)相關(guān)（r=-0.89）;Caspase-8、-9僅在COPD營(yíng)養(yǎng)不良組大鼠肌細(xì)胞中明顯表達(dá),在趾長(zhǎng)伸肌中的Caspase-8的平均光密度（AOD）和積分光密度（I... 

【文章來(lái)源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英漢縮略詞對(duì)照表
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)用溶液的配制
    2.2 研究對(duì)象
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)
        2.2.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 大鼠COPD模型建立
        2.3.2 COPD模型組大鼠營(yíng)養(yǎng)不良的判斷
        2.3.3 模型組成模后分組
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死
        2.3.5 肺功能的測(cè)定
        2.3.6 病理標(biāo)本的制備和保存
        2.3.7 標(biāo)本的病理學(xué)檢測(cè)
        2.3.8 骨骼肌細(xì)胞凋亡率測(cè)定
        2.3.9 骨骼肌細(xì)胞Caspase蛋白酶表達(dá)
        2.3.10 Caspase-3、-8、-9觀察和分析
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    1.模型評(píng)價(jià)
        1.1.大鼠一般情況
        1.2.大鼠肺組織、氣道病理改變(見本章附圖一)
        1.3.肺功能
        1.4 骨骼肌病理變化(見本章附圖二)
    2.大鼠體重變化
    3.趾長(zhǎng)伸肌重量變化
    4.骨骼肌凋亡率測(cè)定
        4.1 實(shí)驗(yàn)大鼠膈肌、趾長(zhǎng)伸肌凋亡率
        4.2 平均凋亡率與體重相關(guān)性分析
        4.3 趾長(zhǎng)伸肌凋亡率與趾長(zhǎng)伸肌重量相關(guān)性分析
        4.4 膈肌凋亡率與趾長(zhǎng)伸肌凋亡率的關(guān)系
    5.Caspase-3表達(dá)
        5.1 實(shí)驗(yàn)大鼠膈肌、趾長(zhǎng)伸肌Caspase-3細(xì)胞核染色分析
        5.2 膈肌、趾長(zhǎng)伸肌Caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞核比率相關(guān)性分析
        5.3 Caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞核比率與TUNEL檢測(cè)的凋亡率相關(guān)性分析
    6.Caspase-8、-9表達(dá)
        6.1 一般結(jié)果
        6.2 膈肌與趾長(zhǎng)伸肌切片Caspase-8免疫組化染色光密度對(duì)比分析
        6.3 膈肌與趾長(zhǎng)伸肌切片Caspase-9免疫組化染色光密度對(duì)比分析
    附圖一 實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織病理學(xué)圖片
    附圖二 實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼肌病理圖片
    附圖三 COPD營(yíng)養(yǎng)不良組Caspase免疫組化圖片
    附圖四 實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼肌凋亡圖片
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述:骨骼肌萎縮中凋亡現(xiàn)象與機(jī)制
    1.細(xì)胞凋亡的途徑
        1.1 死亡受體及配體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的激活
        1.2 線粒體路徑
        1.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑
    2.骨骼肌細(xì)胞凋亡的研究
        2.1 廢用引起的骨骼肌萎縮中的凋亡
        2.2 去神經(jīng)支配骨骼肌萎縮中的凋亡
        2.3 引起骨骼肌凋亡的其它原因
    3.小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間主要研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]血清瘦素、腫瘤壞死因子-α與慢阻肺疾病患者營(yíng)養(yǎng)不良的關(guān)系研究[J]. 楊紅輝,孫圣華,劉純,劉宗道,劉建明,丘萬(wàn)服.  中國(guó)醫(yī)師雜志. 2004(01)
[5]COPD患者缺氧對(duì)TNF-α系統(tǒng)的激活及與營(yíng)養(yǎng)不良的相關(guān)性[J]. 詹娟,孫圣華.  醫(yī)學(xué)臨床研究. 2003(12)
[6]慢性阻塞性肺疾病大鼠模型氣道重塑及生長(zhǎng)因子的研究[J]. 宋一平,崔德健,茅培英,梁延杰,王德文.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2001(05)



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