發(fā)布時(shí)間：2021-05-17 00:48

　　目的探討微小RNA（miR-194）靶向叉頭盒蛋白A1（FoxA1）基因?qū)χ嗵牵↙PS）誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞損傷影響及其可能作用機(jī)制。方法正常培養(yǎng)的肺泡上皮細(xì)胞為NC組,LPS處理的肺泡上皮細(xì)胞為L(zhǎng)PS組,分別或共同將miR-con、miR-194 mimic、si-con、si-FOXA1轉(zhuǎn)染至肺泡上皮細(xì)胞后加入LPS處理。qRT-PCR與Western blot分別檢測(cè)miR-194、FOXA1的mRNA及蛋白表達(dá);MTT檢測(cè)細(xì)胞活力;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;檢測(cè)乳酸脫氫酶（LDH）活性;雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-194與FOXA1的作用關(guān)系;Western blot檢測(cè)Bax、Bcl-2的蛋白水平。結(jié)果與NC組相比,LPS組肺泡上皮細(xì)胞增殖率明顯降低,凋亡率明顯上升,Bax蛋白表達(dá)上調(diào),Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào),LDH活性增強(qiáng);雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證FOXA1是miR-194的靶基因;miR-194過表達(dá)與抑制FOXA1表達(dá)后細(xì)胞增殖率明顯上升,凋亡率明顯下降,Bax蛋白表達(dá)下調(diào),Bcl-2的蛋白表達(dá)上調(diào),LDH活性降低,而共轉(zhuǎn)染miR-194 mimic與pcDNA-FOX... 

【文章來源】：免疫學(xué)雜志. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試劑及材料
    1.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染、LPS處理及分組
    1.3 qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中miR-194、FoxA1mRNA表達(dá)水平
    1.4 蛋白免疫印跡（Western blot）檢測(cè)FoxA1、Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)
    1.5 檢測(cè)細(xì)胞活力及LDH含量
    1.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    1.7 熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 miR-194和FOXA1在LPS誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞A549中的表達(dá)
    2.2 過表達(dá)miR-194對(duì)LPS誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞A549中細(xì)胞損傷的影響
    2.3 過表達(dá)miR-194對(duì)LPS誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞A549凋亡的影響
    2.4 miR-194靶向FOXA1
    2.5 干擾FOXA1對(duì)LPS誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞A549損傷和細(xì)胞凋亡的影響
    2.6 轉(zhuǎn)染miR-194和過表達(dá)FOXA1對(duì)LPS誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞A549細(xì)胞活力及凋亡的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[9]脂多糖誘導(dǎo)急性肺損傷小鼠中E-cadherin和Brg1的表達(dá)及意義[J]. 張榮,彭單伊,夏耘秋,高黎,徐潔,任洛,王莉佳,鄒琳,符州.  免疫學(xué)雜志. 2015(05)

博士論文
[1]FOXA1在急性肺損傷肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡中的作用[D]. 宋嵐.中南大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3190736