miR-29b通過(guò)調(diào)控Bax基因抑制LPS誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞系A(chǔ)549凋亡
發(fā)布時(shí)間:2021-04-27 01:41
目的探討miR-29b對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞系A(chǔ)549凋亡的影響及其機(jī)制。方法將體外培養(yǎng)的A549細(xì)胞分為對(duì)照組、LPS組(給予10 mg/L的LPS處理)、LPS+miR-NC組(轉(zhuǎn)染miR-29b mimics陰性對(duì)照后給予LPS處理)、LPS+miR-29b組(轉(zhuǎn)染miR-29b mimics后給予LPS處理);用RT-qPCR檢測(cè)細(xì)胞中miR-29b的表達(dá)水平;MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;Western blot檢測(cè)Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白的表達(dá);雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)Bax和miR-29b的靶向關(guān)系。結(jié)果與對(duì)照組相比,LPS組、LPS+miR-NC組和LPS+miR-29b組細(xì)胞中miR-29b、Bcl-2蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞存活率均明顯降低,而細(xì)胞凋亡率和Bax、cleaved caspase-3蛋白的表達(dá)水平均明顯升高(P<0.05);與LPS組相比,LPS+miR-29b組細(xì)胞中miR-29b、Bcl-2蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞存活率均明顯升高,而細(xì)胞凋亡率和Bax、cleaved caspas...
【文章來(lái)源】:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2020,40(06)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 細(xì)胞及試劑
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)、分組與處理:
1.2.2 RT-qPCR檢測(cè)miR-29b的表達(dá):
1.2.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率:
1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率:
1.2.5 Western blot檢測(cè)Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白的表達(dá):
1.2.6 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn):
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 轉(zhuǎn)染后A549細(xì)胞中miR-29b表達(dá)升高
2.2 miR-29b過(guò)表達(dá)對(duì)A549細(xì)胞活力的影響
2.3 miR-29b過(guò)表達(dá)對(duì)A549細(xì)胞凋亡的影響
2.4 miR-29b過(guò)表達(dá)對(duì)A549細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
2.5 miR-29b靶基因的預(yù)測(cè)及其驗(yàn)證
3 討論
本文編號(hào):3162518
【文章來(lái)源】:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2020,40(06)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 細(xì)胞及試劑
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)、分組與處理:
1.2.2 RT-qPCR檢測(cè)miR-29b的表達(dá):
1.2.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率:
1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率:
1.2.5 Western blot檢測(cè)Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白的表達(dá):
1.2.6 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn):
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 轉(zhuǎn)染后A549細(xì)胞中miR-29b表達(dá)升高
2.2 miR-29b過(guò)表達(dá)對(duì)A549細(xì)胞活力的影響
2.3 miR-29b過(guò)表達(dá)對(duì)A549細(xì)胞凋亡的影響
2.4 miR-29b過(guò)表達(dá)對(duì)A549細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
2.5 miR-29b靶基因的預(yù)測(cè)及其驗(yàn)證
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本文編號(hào):3162518
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