本文關(guān)鍵詞：溶血磷脂酸在內(nèi)皮祖細胞移殖治療急性肺損傷大鼠中的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目標：探討LPS引發(fā)的大鼠急性肺損傷(acute lung injury ALI),給予經(jīng)溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA)預處理內(nèi)皮祖細胞移殖治療的效果,探究LPA對EPCs的存活及遷移活性的改善作用,提高EPCs移殖治療ALI的效果,為生物學提供基礎(chǔ)實驗數(shù)據(jù)。方法：制建ALI模型,選用密度梯度的離心方法,單核細胞,經(jīng)SD大鼠的骨髓中分離,得到內(nèi)皮祖細胞,用DMEM-F12培養(yǎng)基(含20%優(yōu)良胎牛血清及生長因子)誘導培育；體外分離、培養(yǎng)的內(nèi)皮祖細胞,經(jīng)LPA預處理,察看EPCs的增值活性在體外受LPA影響情況。進一步,經(jīng)LPA過夜處理EPCs后,LPS誘導尾靜脈注射的內(nèi)皮祖細胞移殖,LPS+熒光標記的內(nèi)皮祖細胞懸液,注入急性肺損傷模型大鼠體內(nèi),觀察經(jīng)LPA處理后的內(nèi)皮祖細胞的移殖,治療大鼠急性肺損傷的作用。大鼠隨機分為4組：正常對照組、LPS對照組(LPS+PBS組)、內(nèi)皮祖細胞對照組(LPS+EPCs組)、治療組(LPS+EPCs+LPA組),大鼠ALI模型的建制,LPS誘導,方法靜脈給藥,LPS+內(nèi)皮祖細胞移殖組,熒光標識的EPCs懸液(EPCs2×106/0.5ml),注入靜脈于ALI模型中,治療組(LPS+EPCs+LPA組)經(jīng)LPA預處理的EPCs注射于ALI模型大鼠尾靜脈。分別于移殖后1、7天取肺組織,選用HE染色評價病理改變；肺組織的干/濕比值(W/D)檢測,選用實時熒光PCR方法,檢測TLR4mRNA、NF-KBmRNA的表達情況,在肺組織中。結(jié)果：成功分離、培養(yǎng)EPCs；LPA能夠促進EPCs的增殖, EPCs移植ALI大鼠結(jié)果顯示,EPCs移殖可減輕急性肺損傷大鼠肺炎癥細胞的浸潤、細胞損傷,降低組織的W/D比值；EPCs經(jīng)LPA預處理,大鼠外周血中內(nèi)皮祖細胞的含量可顯著提高；同時TLR4 mRNA、 NF-KBmRNA的表達在肺組織被下調(diào),LPA預處理EPCs組相比單純EPCs移殖組明顯減少炎癥細胞在急性肺損傷大鼠肺結(jié)構(gòu)的浸潤、細胞損傷,下降肺組織的W/D比值；TLR4 mRNA、 NF-KBmRNA的表達在肺組織被下調(diào)(p0.001)。 結(jié)論：1、選用密度梯度的離心方法,經(jīng)大鼠的骨髓分離,培育了EPCs在體外；2、LPA預處理EPCs靜脈移殖后能成功到達損傷大鼠的肺組織。3.LPA預處理EPCs移殖可緩解LPS誘導的急性肺損傷,修復了損傷的血管從而通過減少炎性細胞滲出和粘附,減輕了炎癥應答；通過調(diào)節(jié)免疫細胞,下調(diào)了促炎癥反應的應答,使機體恢復促炎一抗炎平衡。4.LPA促使EPCs增殖抗其凋亡,明顯減緩LPS誘導的急性肺損傷,改善預后,為急性肺損傷治療提供了新的思路。
【關(guān)鍵詞】：溶血磷脂酸 內(nèi)皮祖細胞 大鼠 急性肺損傷
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R563
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• ~.略詞表9-11
• 引言11-19
• 參考文獻14-19
• 1. 材料與方法19-26
• 1.1 材料19-20
• 1.2 方法20-26
• 2. 結(jié)果26-38
• 2.1 內(nèi)皮祖細胞的分離培養(yǎng)26
• 2.2 LPA預處理內(nèi)皮祖細胞26-28
• 2.3 溶血磷脂酸預處理內(nèi)皮祖細胞移殖治療急性肺損傷大鼠實驗28-29
• 2.4.Real-time PCR 方法，檢測 NF-kB mRNA 及 TLR4mRNA 表達29-34
• 2.5 流式細胞儀檢測外周血中EPCs的含量34-38
• 3. 討論38-43
• 參考文獻43-49
• 結(jié)論49-50
• 文獻綜述50-56
• 參考文獻53-56
• 致謝56-57
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文57

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關(guān)鍵詞：溶血磷脂酸在內(nèi)皮祖細胞移殖治療急性肺損傷大鼠中的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：316091