目的觀察人胚肺成纖維細(xì)胞（MRC-5）在LPS刺激前后HIF-1α、TGF-β1的表達(dá)情況及對增殖、凋亡、遷移的影響,并通過IL4、INF-γ的干預(yù),分析MRC-5中HIF-1α和TGF-β1的表達(dá)變化,從而為COPD患者氣道重塑的機(jī)制提供理論支持。方法采用100μg·L^-1 LPS干預(yù)MRC-5,用CCK8、流式細(xì)胞儀和Transwell分別檢測MRC-5增殖、凋亡及遷移情況,并使用RT-PCR、Western blot法檢測細(xì)胞內(nèi)HIF-1α,TGF-β1的表達(dá)情況;同時(shí)加入不同濃度IL-4,INF-γ刺激MRC-5,檢測不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞內(nèi)HIF-1α和TGF-β1蛋白表達(dá)變化。結(jié)果與MRC-5組相比,LPS+MRC-5組的細(xì)胞增殖能力明顯增強(qiáng)（P<0.05）,處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著增多（P<0.05）,細(xì)胞凋亡率明顯減少（P<0.05）,細(xì)胞遷移能力明顯提高（P<0.05）,同時(shí)HIF-1α和TGF-β1的mRNA及蛋白水平均顯著升高（P<0.05）。而INF-γ對MRC-5細(xì)胞刺激時(shí)間的增加,HIF-1α和TGF-β1表達(dá)量同... 

【文章來源】：沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,37(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 儀器與材料
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 CCK8法檢測細(xì)胞增殖能力
    2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期
    2.4 Annexin V/PI雙染檢測細(xì)胞凋亡
    2.5 細(xì)胞遷移功能測定
    2.6 RT-PCR法檢測LPS刺激下MRC-5細(xì)胞內(nèi)HIF-1α、TGF-β1 mRNA的表達(dá)
    2.7 Western blot法檢測LPS刺激下MRC-5細(xì)胞內(nèi)HIF-1α、TGF-β1蛋白的表達(dá)
    2.8 Western blot法檢測IL-4、INF-γ刺激下MRC-5中HIF-1α、TGF-β1 蛋白的表達(dá)
    2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 細(xì)胞增殖
    3.2 細(xì)胞周期
    3.3 細(xì)胞凋亡
    3.4 細(xì)胞遷移能力
    3.5 LPS刺激下MRC-5細(xì)胞內(nèi)HIF-1α、TGF-β1 mRNA及蛋白的表達(dá)
    3.6 INF-γ刺激下MRC-5細(xì)胞內(nèi)HIF-1α、TGF-β1 蛋白的表達(dá)
    3.7 IL-4刺激下MRC-5細(xì)胞內(nèi)HIF-1α、TGF-β1 蛋白的表達(dá)
4 討論與結(jié)論



本文編號(hào)：3147468