發(fā)布時間：2021-04-14 01:55

　　急性肺損傷（acute lung injury,ALI）是伴有嚴(yán)重呼吸功能障礙的一個復(fù)雜多變的過程。治療和減輕ALI對機(jī)體的損害,降低死亡率,一直是醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)。目前在傳統(tǒng)的ALI治療基礎(chǔ)之上,對ALI的基因治療也取得了一些進(jìn)展。適合于ALI基因治療的目的基因分為抗氧化劑編碼基因、抗炎基因、保護(hù)和維持肺泡上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞功能的基因、抑制ARDS纖維化增生的基因等幾類。在這幾類基因中,保護(hù)和維持肺泡上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞功能的基因,是對損傷的肺泡上皮細(xì)胞的修復(fù)起關(guān)鍵作用的基因,而修復(fù)損傷的肺泡上皮細(xì)胞又是ALI救治的重點(diǎn)之一。但由于在ALI發(fā)生時,肺泡上皮細(xì)胞不僅僅是單純的結(jié)構(gòu)功能損傷,還伴有嚴(yán)重的凋亡現(xiàn)象,因此,對肺泡上皮細(xì)胞在ALI時的修復(fù)涉及到細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能的修復(fù)和肺泡上皮細(xì)胞的再生。肺間質(zhì)細(xì)胞對正常肺泡上皮細(xì)胞的組織形成和對ALI時上皮細(xì)胞損傷的修復(fù)都具有重要作用。許多由間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子都可作為調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞增生和分化的信號分子,其中角質(zhì)細(xì)胞生長因子（keratinocyte growth factor,KGF）是最重要的因子之一。KGF不僅是上皮細(xì)胞的絲裂原,也是促進(jìn)肺泡上... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

-1一步法RT-PCR檢測正常小鼠肺組織KGFR和KGF存在情況

第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文法 RT-PCR 檢測 LPS 作用后小鼠肺組織和 A549 細(xì)胞的 KGFR 表達(dá)用小鼠肺和 A549 細(xì)胞后，小鼠肺組織于 3、24、48、72h，A54h 分別提取 mRNA 進(jìn)行 RT-PCR 檢測。發(fā)現(xiàn) KGFR 表達(dá)隨著 L降趨勢，通過 Bio-Rad 凝膠成像軟件進(jìn)行半定量分析，以標(biāo)）為統(tǒng)計指標(biāo)，顯示小鼠肺組織各實驗組與對照組之間以及有顯著差異（P<0.01）。A549 細(xì)胞除了 24h 組與對照組比較有，其余各組與對照組比較以及它們相互間比較都沒有明顯差異-2 和表 1-1）1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

40 cycles標(biāo)準(zhǔn)曲線制作[20]及熒光定量方法的 KGFR 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)純化后測依照拷貝數(shù)將此擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋為 103、104、105、1濃度梯度為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行 FQ-PCR，PE5700 熒光定量。每一次循環(huán)，PE5700 熒光定量 PCR 儀計數(shù)一值并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本的拷貝數(shù)。理±s 表示，各組間比較采用計量資料的 t 檢驗。定 KGFR 標(biāo)準(zhǔn)曲線[20]小鼠肺組織進(jìn)行RT-PCR獲得正常KGFR的DNA 103、104、105、106四個濃度梯度作為四個標(biāo)準(zhǔn)對數(shù)作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。（見圖 1-3-1）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]用熒光定量PCR方法檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞中外源基因的拷貝數(shù)[J]. 李影,何蘊(yùn)韶,程剛,李虎.  中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2001(01)



本文編號：3136425