目的:研究維生素D對肺纖維化的影響及相關機制,為肺纖維化的防治提供新思路。方法:本研究主要包括三個部分:第一部分通過生長轉化因子β（TGF-β）誘導細胞發(fā)生上皮間質轉化（EMT）構建細胞纖維化模型,通過細胞形態(tài)學及Western blot檢測相關蛋白的表達情況確定造模是否成功。第二部分主要研究1,25-（OH）2D3對TGF-β引起細胞上皮間質轉化的影響。第一部分結果顯示,分別以5 ng/ml和10 ng/ml TGF-β可以引起A549細胞和BEAS-2B細胞發(fā)生上皮間質轉化。通過CCK-8和前期實驗結果確定維生素D（1,25-（OH）2D3）的劑量分別為10 n M和50 n M。實驗分為四組:空白對照組、TGF-β組、維生素D組、TGF-β和維生素D聯(lián)合處理組。通過細胞劃痕實驗分析細胞的遷移能力,Transwell實驗分析細胞的侵襲能力、流式細胞儀檢測細胞的抗凋亡能力、免疫熒光了解E-cad、Vimentin、VDR表達位置和表達量的改變情況,Western blot檢測E-cad、Vimentin、β-catenin、Snail、Slug、VDR的表達情況,RT-PCR檢測纖維... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

肺組織損傷修復的四個階段

圖 2 EMT 形態(tài)學及標志蛋白改變在組織損傷修復和上皮間質轉化過程中, TGF-β 均起著重要作用。TGF-β 是一種具有多種功能的細胞因子，他通過影響細胞增生、分化、凋亡和產生細胞外基質來調節(jié)組織形態(tài)和功能[6]。研究表明在各種纖維化疾病的動物模型中 TGF-β 含量升高[7-9]

TGF-β處理A549細胞發(fā)生形態(tài)學改變(100X)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Snail基因修飾對骨髓基質干細胞骨架結構穩(wěn)定作用及促遷移和對無血清培養(yǎng)誘導細胞凋亡的保護作用研究[J]. 查運紅,梅元武,毛玲,賀杰峰,殷濤,張立,王全勝.  生物工程學報. 2007(04)



本文編號：3131340