目的:觀察肝素對肺上皮細胞株（A549細胞） EGFR活性及表達MUC5AC的影響及探討可能的機制。方法:（1）體外培養(yǎng)人氣道上皮細胞系A(chǔ)549細胞。（2）實驗分為五組:對照組（無干預(yù)無刺激）;模型組（PMA刺激）,用10ng/ml的PMA刺激A549細胞1小時;干預(yù)組（G50:PMA和肝素50U/ml,G150: PMA和肝素150u/ml,G450: PMA和肝素450u/ml）,干預(yù)組在PMA刺激前用不同濃度肝素預(yù)處理半小時。（3）各組處理24小時后用MTT法測的OD值分析各組藥物對細胞活力的影響。（4）各組孵育24h后,采用RT-PCR檢測各組細胞中MUC5AC mRNA含量及ELISA檢測培養(yǎng)上清中MUC5AC;Western印跡分析磷酸化表皮生長因子（p-EGFR）蛋白水平。結(jié)果:（1）模型組和各干預(yù)組24小時后用MTT法測的OD值與對照組比較差異均無統(tǒng)計意義（P均>0.05）,說明用于實驗的不同濃度肝素和/或PMA對A549細胞的生長無影響。（2）模型組上清液中的MUC5AC蛋白含量與正常對照組相比有顯著增高（為p<0.01）;給予肝素干預(yù)后,明顯降低了PMA... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

A549正常對照組（ⅹ200）

表 3 肝素對 PMA 誘導(dǎo)氣道上皮細胞 p-EGFR 表達的影響( ±s ,n=3)Tab3 Effects of hepin on p-EGFR expression in each group組別 對照組 模型組 G50 組 G150 組 G450 組p-EGFR(灰度比值)0.763±0.026 1.130±0.070 0.960±0.097 0.736±0.071 0.608±0.011

MUC5ACmRNA電泳結(jié)果


本文編號：3127106