發(fā)布時(shí)間：2021-04-09 06:31

　　目的:觀察肝素對(duì)肺上皮細(xì)胞株（A549細(xì)胞） EGFR活性及表達(dá)MUC5AC的影響及探討可能的機(jī)制。方法:（1）體外培養(yǎng)人氣道上皮細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞。（2）實(shí)驗(yàn)分為五組:對(duì)照組（無干預(yù)無刺激）;模型組（PMA刺激）,用10ng/ml的PMA刺激A549細(xì)胞1小時(shí);干預(yù)組（G50:PMA和肝素50U/ml,G150: PMA和肝素150u/ml,G450: PMA和肝素450u/ml）,干預(yù)組在PMA刺激前用不同濃度肝素預(yù)處理半小時(shí)。（3）各組處理24小時(shí)后用MTT法測(cè)的OD值分析各組藥物對(duì)細(xì)胞活力的影響。（4）各組孵育24h后,采用RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中MUC5AC mRNA含量及ELISA檢測(cè)培養(yǎng)上清中MUC5AC;Western印跡分析磷酸化表皮生長因子（p-EGFR）蛋白水平。結(jié)果:（1）模型組和各干預(yù)組24小時(shí)后用MTT法測(cè)的OD值與對(duì)照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)意義（P均>0.05）,說明用于實(shí)驗(yàn)的不同濃度肝素和/或PMA對(duì)A549細(xì)胞的生長無影響。（2）模型組上清液中的MUC5AC蛋白含量與正常對(duì)照組相比有顯著增高（為p<0.01）;給予肝素干預(yù)后,明顯降低了PMA... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

A549正常對(duì)照組（ⅹ200）

表 3 肝素對(duì) PMA 誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞 p-EGFR 表達(dá)的影響( ±s ,n=3)Tab3 Effects of hepin on p-EGFR expression in each group組別 對(duì)照組 模型組 G50 組 G150 組 G450 組p-EGFR(灰度比值)0.763±0.026 1.130±0.070 0.960±0.097 0.736±0.071 0.608±0.011

MUC5ACmRNA電泳結(jié)果


本文編號(hào)：3127106