目的探討Keap1/Nrf2信號通路在PA-LPS上調(diào)A549細胞粘蛋白MUC5AC表達中的作用。方法體外培養(yǎng)人體氣道上皮細胞系A(chǔ)549細胞,用不同濃度（5ug/mL、10 ug/mL和15 ug/mL）PA-LPS干預(yù)不同時間（0h、8h、12h、24h）,實時熒光PCR（Q-PCR）分別檢測干預(yù)后MUC5AC mRNA的表達水平,以明確PA-LPS是否能上調(diào)A549細胞MUC5AC的表達,以及PA-LPS最佳干預(yù)濃度和時間。干預(yù)24h后采用Western Blot檢測MUC5AC以及抗氧化因子蛋白的表達。用不同劑量Nrf2 siRNA轉(zhuǎn)染A549細胞,轉(zhuǎn)染24h后,去血清過夜培養(yǎng),加入10ug/mL LPS干預(yù)不同時間,Q-PCR檢測該細胞Nrf2及MUC5AC mRNA的表達情況以確定最佳轉(zhuǎn)染劑量和PA-LPS干預(yù)時間。同前方法檢測PA-LPS干預(yù)Nrf2 siRNA轉(zhuǎn)染后A549細胞MUC5AC、Keap1/Nrf2及其下游氧化基因mRNA及蛋白的表達情況。結(jié)果 10ug/mL PA-LPS干預(yù)24h后,A549細胞粘蛋白MUC5AC mRNA及蛋白水平均明顯上調(diào)（p<0... 

【文章來源】：2011年第三十三屆浙江省呼吸系病學(xué)術(shù)年會暨呼吸疾病診治新進展學(xué)習(xí)班論文匯編浙江省科學(xué)技術(shù)協(xié)會會議論文集

【文章頁數(shù)】：8 頁


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