目的:探討miR-29b對肺纖維化上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的調(diào)控和作用機(jī)制。方法:細(xì)胞培養(yǎng):1.TGF-β1作為誘導(dǎo)劑,誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生纖維化。2.miR-29b-3p agomir/antagomir轉(zhuǎn)染入TGF-β1誘導(dǎo)后A549細(xì)胞,共培養(yǎng)24小時(shí)后用ELISA、qRT-PCR檢測細(xì)胞外液及細(xì)胞中TGF-β1、Smad3、E-cad、α-SMA、Col1A1蛋白質(zhì)及其mRNA、miR-29b-3p的表達(dá)。臨床研究:將人群分為特發(fā)性肺纖維化組（Iidiopathic pulmonary fibrosis,IPF）、對照組。通過ELISA、qRT-PCR檢測上述人群的TGF-β1/Smad3、E-cad、α-SMA、Col1A1蛋白質(zhì)及其mRNA、miR-29b-3p的表達(dá)。結(jié)果:細(xì)胞培養(yǎng):1.空白對照組與TGF-β1組相比,TGF-β1/Smad3、α-SMA、Col1A1的蛋白質(zhì)及其mRNA表達(dá)增加（P<0.05）,miR-29b-3p、E-cad的蛋白質(zhì)及其mRNA表達(dá)明顯降低（P<0.05）。2.miR-29b-3p agomir能增加miR-29b-3p、E-cad的... 

【文章來源】：杭州師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化（×40）

位論文 miRNA-29b 對肺纖維化上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的 誘導(dǎo) A549 細(xì)胞纖維化GF-β1 誘導(dǎo) A549 細(xì)胞發(fā)生 EMT 建立肺纖維化模d3、α-SMA、Col1A1 及其 mRNA 表達(dá)明顯升高，明顯降低。結(jié)果如下表 4.2.1、4.2.2 和圖 4.GF-β1 刺激 A549 細(xì)胞后 EMT 標(biāo)志物蛋白質(zhì)表達(dá) E 組 F 組 40.25±3.66 1.77±1.74 29.29±1.25 17.19±1.30 11.53±1.50 1.72±0.09 1.90±0.05 15.71±2.01 5.41±0.92 0.81±0.08 TGF-β1 組，F(xiàn) 組：空白對照組，與空白對照組相比，

圖 4.3.1 miR-29b 轉(zhuǎn)染后各蛋白質(zhì) mRNA 表達(dá)比較表 4.3.2 miR-29b-3p 轉(zhuǎn)染后各蛋白質(zhì)表達(dá)量（ x±s）指標(biāo)（ng/ml）A 組 B 組 C 組 D 組 E 組TGF-β1 30.72±2.70 43.60±2.61 73.38±3.02 45.98±3.03 40.25±3.66Smad3 18.02±1.79 26.95±1.22 36.33±2.36 27.07±1.64 29.29±1.25Col1A1 7.15±0.89 13.68±2.32 21.40±1.64 12.73±0.70 11.53±1.50E-cad 11.26±1.17 2.08±0.3 0.95±0.15 2.37±0.70 1.89±0.05α-SMA 6.69±0.49 5.60±1.37 8.12±1.59 5.31±0.50 5.41±0.92A 組：miR-29b agomir；B 組：miR-29b agomir NC；C 組：miR-29b antagomi；D 組：miR-29bantagomir NC；E 組：TGF-β1 組。A、C 組與 E 組比較，除α-SMA 外，P＜0.05。B、D 組與E 組比較，P＞0.05。


本文編號：3101835