目的:建立一種胃酸與內(nèi)毒素的協(xié)同作用的實(shí)驗(yàn)性吸入性肺炎模型并探究吸入性肺炎與細(xì)胞焦亡的關(guān)系。方法:雄性清潔級(jí)SD大鼠74只,體重約為200-240g,10只大鼠用于提取大鼠胃內(nèi)容物,通過(guò)過(guò)濾、高壓滅菌、離心、鹽酸調(diào)節(jié)PH值等方法制備酸性胃內(nèi)容物（Combined acid and small particles,CASP）,將剩余64只SD雄性大鼠隨機(jī)分配到4個(gè)組,分別為對(duì)照組（NS/NS組）,酸性胃內(nèi)容物/鹽水組（CASP/NS組）,鹽水/LPS組（NS/LPS組）,酸性胃內(nèi)容物/LPS組（CASP/LPS組）。所有動(dòng)物在第一次滴注后（即在滴注酸性胃內(nèi)容物懸液或生理鹽水）6h或24h后麻醉放血處死。取肺組織行HE染色,光鏡下觀察肺組織病理改變并評(píng)估肺損傷;檢測(cè)肺組織MPO;酶聯(lián)免疫法檢測(cè)IL-1β表達(dá),Western blot檢測(cè)GSDMD,NLRP3表達(dá);免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry,IHC）檢測(cè)GSDMD表達(dá)。檢測(cè)濕干比,并通過(guò)支氣管肺泡灌洗,檢測(cè)BALF中總蛋白濃度、BALF中有核細(xì)胞計(jì)數(shù)。結(jié)果:1.HE染色病理:NS/NS組大鼠肺組織保持基本肺泡完整... 

【文章來(lái)源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠肺組織HE染色后病理切片

肺組織MPO含量

研究論文264.不同吸入性肺炎中NLRP3，GSDMD蛋白的表達(dá)Westernblot結(jié)果顯示：氣管內(nèi)滴注6h后，CASP/LPS組、CASP/NS組、NS/LPS組GSDMD表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P均<0.05)；造模24h后，CASP/LPS組、CASP/NS組、NS/LPS組GSDMD表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P均<0.05)（Fig.4A）。造模6h時(shí)，CASP/LPS組NLRP3表達(dá)明顯高于對(duì)照組(均P<0.05)。造模24h后，CASP/LPS組、CASP/NS組NLRP3表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P均<0.05)。（Fig.4B）。8.免疫組織化學(xué)觀察GSDMS表達(dá)：半定量結(jié)果示氣管內(nèi)滴注6h后，CASP/LPS組IOD/AREA[(1.94±0.12)×10-2]高于CASP/NS組[(0.82±0.05)×10-2]和NS/LPS組[(0.57±0.06)×10-2]及對(duì)照組[(0.53±0.04)×10-2]，CASP/NS組高于對(duì)照組(P均<0.05)。24h后，CASP/LPS組IOD/AREA[(1.29±0.13)×10-2]高于CASP/NSNS/NSNS/NSCASP/NSCASP/NSNS/LPSNS/LPSCASP/LPSCASP/LPS6h24h6h24h6h24h6h24h6hGSDMDGAPDHNLRP3AB圖4各組大鼠GSDMD、NLRP3蛋白表達(dá)結(jié)果Fig.4ExpressionofGSDMD、NLRP3proteininlungtissue.*P＜0.05.


本文編號(hào)：3101265