目的:研究轉(zhuǎn)化生長因子β1 （TGF-β1）和干擾素-γ（IFN-γ）對氣道上皮細(xì)胞結(jié)締組織生長因子（CTGF）表達(dá)的調(diào)控作用及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。方法:原代培養(yǎng)新西蘭兔氣道上皮細(xì)胞,待細(xì)胞生長融合成片（細(xì)胞生長第5天）進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):（1）實(shí)驗(yàn)1:將培養(yǎng)細(xì)胞隨機(jī)分為8組,4個(gè)實(shí)驗(yàn)組加入終濃度為10ng/ml的TGF-β1,4個(gè)對照組加入等量無血清培養(yǎng)液,然后分別于6h、12h、24h、36h收集細(xì)胞,用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測各組氣道上皮細(xì)胞CTGF蛋白表達(dá)水平;（2）實(shí)驗(yàn)2:將培養(yǎng)細(xì)胞隨機(jī)分為4組,3個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別加入不同濃度的TGF-β1 （1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml）,對照組加入等量無血清培養(yǎng)液,用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測各組氣道上皮細(xì)胞CTGF蛋白表達(dá)水平,用原位雜交法檢測各組氣道上皮細(xì)胞Smad7 mRNA表達(dá)水平;（3）實(shí)驗(yàn)3:將培養(yǎng)細(xì)胞隨機(jī)分為4組,3個(gè)實(shí)驗(yàn)組加入終濃度為10ng/ml的TGF-β1的同時(shí)分別加入不同濃度的IFN-γ（10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml）,對照組加入等量TGF-β1的同時(shí)加入等量無血清培養(yǎng)液,用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測各組氣道上皮細(xì)胞C... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

正常氣道上皮細(xì)胞細(xì)胞生長第2天×200

正常氣道上皮細(xì)胞細(xì)胞生長第5天×200

正常氣道上皮細(xì)胞細(xì)胞生長第7天×200

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TGFβ1對轉(zhuǎn)染Smad4/Smad7基因的大鼠系膜細(xì)胞Ⅰ、Ⅳ型膠原表達(dá)的影響[J]. 楊琛,戴璐,黃瑾,劉學(xué)光,陳琦,張秀榮,郭慕依.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2004(02)
[2]哮喘大鼠氣道上皮CTGF表達(dá)及其與氣道重構(gòu)關(guān)系的研究[J]. 劉國祥,張雷,黃英.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(20)
[3]胰酶冷消化加刮刷法分離培養(yǎng)氣管上皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 杜永成,許建英,延峰.  中國病理生理雜志. 2003(09)



本文編號：3004787