目的通過建立肺缺血再灌注損傷(lung ischemic-reperfusion injury,LIRI)模型,觀察可溶性腫瘤壞死因子受體-Fc融合蛋白(soluble tumor necrosis receptor-Fc fusion protein,sTNFRI-Fc protein)對其對肺損傷的保護性作用效果,并觀察肺缺血再灌注中缺氧誘導因子-1α( hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及c-fos在大鼠肺缺血損傷中的作用機制,進一步探討sTNFRI-Fc保護作用的深層機制和原理。方法150只Wistar大鼠不拘雌雄隨機分為三組,每組50只,I/R組(行左肺缺血再灌注損傷),CN組(假手術只開胸而不行左肺缺血再灌注損傷),TF組(行左肺缺血再灌注損傷后再靜脈給予可溶性TNFRI-Fc融合蛋白3μg/㎏),每組又分為0、1、2、4、8 h五個亞組。在呼吸機輔助下,開胸后I/R及TF組大鼠左肺門阻斷行缺血45分鐘,開放左肺門再灌注作為缺血再灌注損傷模型。分別于缺血再灌注后0、1、2、4和8 h取材。實驗結束時摘取肺組織測肺組織濕/干重比值(W/D),制成組織勻漿測髓過氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量。并留取肺組織采用組織病理學、組織芯片技術、免疫組織化學染色技術與圖象分析技術,觀察肺組織病理學改變、HIF-1α及c-fos的表達及灰度值變化。結果經過缺血再灌注后,各實驗組的檢測指標呈現明顯差異:與I/R組相比,TF組的病理組織學光鏡下肺泡破壞減少,出血,炎癥細胞浸潤明顯改善;SOD系統(tǒng)在TF組得到保護,破壞減少,與I/R組差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),與CN組差異不明顯(p0.05);肺組織MPO及MDA在I/R組活力較余組明顯增強(P0.01),而CN組和TF組MPO活力相仿,無統(tǒng)計學意義(P0.05)。HIF-1α與c-fos的陽性表達位于肺泡上皮細胞胞核或胞漿,其表達強度肺再灌注組高于肺缺血再灌注行可溶性TNFRI-Fc融合蛋白處理組與對照組。隨缺血再灌注時間的延長HIF-1α及c-fos表達增強,于4h時達最高峰。肺缺血再灌注組的表達強度高于肺缺血再灌注行可溶性TNFRI-Fc融合蛋白處理組正常對照組(P0.05)。缺血再灌注后肺組織細胞凋亡的變化:與對照組比較I/R組與TF組在各時相點表達均增強,主要分布在肺泡上皮細胞的胞核,但TF組在各時相點表達均弱于I/R組。結論在體動物左肺阻斷/開放是經典的肺臟缺血再灌注損傷模型,本實驗亦證實其具有明確的實驗損傷效果;缺血再灌注時HIF-1α的應激性升高對于其適應缺血再灌注有重要意義,它在一定程度上直接影響細胞凋亡調控基因c-fos的變化。失代償的結果可能引起肺組織細胞凋亡異常增加,影響缺血再灌損傷時肺組織功能導致肺臟損傷�？扇苄訲NFRI-Fc融合蛋白對移植肺缺血再灌注損傷有顯著的保護作用,與其有效中和TNFα并阻斷其生物學活性有關。細胞凋亡與c-fos、HIF-1α表達強度的變化呈正相關(r分別為0.872,0.945,P0.05)。
【學位單位】：寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2009
【中圖分類】：R563
【文章目錄】：
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結果
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綜述
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1 李建強;井軍虎;趙卉;劉卓拉;;膽紅素對大鼠肺臟缺血再灌注損傷保護作用的研究[J];中國組織化學與細胞化學雜志;2008年03期

2 歐陽文;腦缺血損傷與c-fos原癌基因表達[J];國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊;1998年02期

3 劉亞玲;馬永豐;;丙泊酚對大鼠肝臟缺血-再灌注損傷c-fos、c-jun蛋白及細胞凋亡的影響[J];臨床麻醉學雜志;2008年06期

4 呂回,陶莉,陳克正,萬根平;缺氧缺血肺損傷新生鼠肺組織細胞凋亡及Fas/FasL mRNA的表達和意義[J];實用醫(yī)學雜志;2005年02期

5 肖建生,葉啟發(fā),蔡方剛,牛英,張毅,許賢林;肝臟缺血再灌注對即早基因c-fos、c-jun表達影響的研究[J];中國醫(yī)學工程;2005年01期

6 周小鴿,張勁松,張小平,張野,紀小龍,Kristian Sandvej,Stephen J.Hamilton-Dutoit;組織芯片技術在檢測正常組織和腫瘤組織抗原表達中的應用[J];中華病理學雜志;2002年02期

7 張效杰,賈晉斌,鮑民生,李正中;大鼠肝臟缺血再灌注損傷c-fos表達及預處理的保護作用[J];中華肝臟病雜志;1999年S1期

8 郭建榮,崔健君,賈有海,趙平,孟凌新;異丙酚對大鼠腦缺血/再灌注時腦組織c-fos基因表達的影響[J];中華麻醉學雜志;2003年02期

9 曹義戰(zhàn),李金聲,王伯良,仲月霞,晉興,陸將,何保健;局灶性腦缺血再灌注損傷后c-fos表達及高壓氧的治療作用[J];中國急救醫(yī)學;2002年07期

10 王光海,郭國際;c-fos原癌基因與腦缺血[J];卒中與神經疾病;2003年06期

本文編號：2878301