本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對肺纖維化模型的治療作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分 BLM誘導(dǎo)肺纖維化模型與鑒定目的：建立博萊霉素(BLM)誘導(dǎo)的肺纖維化(pulmonary fibrosis,PF)小鼠模型,為采用人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(HUC-MSCs)治療PF模型做前期準(zhǔn)備。方法：將C57BL/6小鼠隨機(jī)分為PBS(空白對照組)、BLM(模型組)2組,每組18只。腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,行氣管滴注術(shù),PBS組、BLM組分別給予50μl PBS和50 BLM (5mg/kg)。分別在第7d、14d、21d處死小鼠并收集肺組織標(biāo)本。HE染色觀察肺組織病理損傷并進(jìn)行評分、Masson染色觀察肺組織中膠原沉積并進(jìn)行評分、羥脯氨酸(HYP)檢測肺組織中膠原含量。結(jié)果：經(jīng)氣管滴注BLM7d、14d、21d后,BLM與PBS相比較,體重和生存率明顯下降,HE染色病理結(jié)果表現(xiàn)為由初期肺泡炎癥和中后期纖維化程度逐漸加重；Masson染色可見隨著時間變化肺組織出現(xiàn)條狀或者片狀藍(lán)色膠原聚集；HYP檢測顯示肺部膠原含量逐漸升高,尤其是在21d后,兩組差異最大且有明顯統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：經(jīng)氣管滴注給予BLM 21天后,可以建立穩(wěn)定的肺纖維化鼠模型。第二部分 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對肺纖維化模型的治療作用目的：確定采用HUC-MSCs治療PF模型的最佳時間點,研究HUC-MSCs對PF模型的保護(hù)作用,探討其作用可能存在的分子機(jī)制。方法：將C57BL/6小鼠隨機(jī)分為PBS+PBS(空白對照組),PBS+HUC-MSCs(干細(xì)胞對照組),BLM+PBS(模型組),BLM+HUC-MSCs(干細(xì)胞治療組)4組,每組10只。腹腔注射麻醉后行氣管滴注術(shù),PBS+PBS組、PBS+HUC-MSCs組和BLM+PBS、 BLM+HUC-MSCs分別滴注50μl PBS和50μl BLM (5mg/kg),分別在1h、12h、24h三個時間點后PBS+HUC-MSCs組和BLM+HUC-MSCs組經(jīng)氣管滴入80μl HUC-MSCs懸濁液(1×106/只),PBS+PBS組、BLM+PBS組氣管滴入PBS(80μl/只),在給予HUC-MSCs后的第21天收集肺組織標(biāo)本,用HE及Masson染色觀察肺組織中肺泡炎癥及膠原改變與評分,以確定最佳給予細(xì)胞時間點；重新建模分組,方法及分組情況同前,在最佳時間點給予HUC-MSCs/PBS,在21天時收集肺組織及BALF液,用HE及Masson染色觀察肺組織病理改變與評分,用ELISA方法檢測各組BALF液中HYP、TGF-β1、TNF-α、IFN-γ、IL-1p蛋白表達(dá),并用CM-Di染料標(biāo)記HUC-MSCs,觀察其在肺組織中分布與遷移情況。結(jié)果：HE及Masson染色病理結(jié)果顯示：氣管滴入BLM后分別在1h、12h、24h給予HUC-MSCs治療后,與PF組相比,治療組肺泡炎癥及膠原沉積均明顯減輕,且BLM滴入1h后立即給予HUC-MSCs治療效果最佳；同時,模型組相比,立即給予HUC-MSCs治療組可降低小鼠的死亡、恢復(fù)體重減輕與缺氧等臨床表現(xiàn),HE染色觀察肺泡炎癥及出血減輕,Masson染色顯示膠原沉積減少,ELISA方法檢測到HYP、TGF-β1、TNF-α、IL-1β明顯降低而IFN-y升高。CM-Dil示蹤結(jié)果顯示：其可高效率的標(biāo)記HUC-MSCs.氣管滴注CM-Dil標(biāo)記的HUC-MSCs后,分別在1h、24h、7d、14d、21d均可在肺組織中觀察到HUC-MSCs分布,且HUC-MSCs并未分化為肺泡Ⅱ型細(xì)胞的特異性蛋白SP-C和上皮細(xì)胞黏鈣蛋白E-cadherin。結(jié)論：HUC-MSCs可以改善PF小鼠模型肺組織損傷及膠原沉積程度,對PF小鼠具有保護(hù)作用,且越早給予HUC-MSCs細(xì)胞治療效果越好,其可能與旁分泌細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)化為類上皮細(xì)胞等因素發(fā)揮作用有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：博萊霉素 肺纖維化 氣管滴注 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 肺纖維化 治療
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R563;R-332
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 前言13-17
• 參考文獻(xiàn)15-17
• 第一部分 博萊霉素誘導(dǎo)肺纖維化模型的建立與鑒定17-25
• 前言17
• 材料與方法17-20
• 結(jié)果20-22
• 討論22-24
• 參考文獻(xiàn)24-25
• 第二部分 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對肺纖維化模型的治療作用25-38
• 材料和方法25-28
• 結(jié)果28-34
• 討論34-37
• 參考文獻(xiàn)37-38
• 全文總結(jié)38-39
• 文獻(xiàn)綜述39-46
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 致謝46-47
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果及發(fā)表論文47

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1 潘金兵,侯宇虹,齊景憲;喀利普蘭對大鼠肺纖維化模型的作用[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2004年10期

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5 穆建琴;魏路清;;抗bFGF抗體對肺纖維化模型的干預(yù)作用[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2010年02期

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本文編號：285730