目的 1.研究慢性支氣管哮喘狀態(tài)下,大鼠肺組織中透明質(zhì)酸(hyaluronan ,HA)的表達,大鼠支氣管肺泡灌洗液中(brochoalveolar lavage fluid ,BALF)HA的含量,大鼠氣道中CD44蛋白的表達。 2.研究慢性支氣管哮喘狀態(tài)下,大鼠氣道中細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)1/2和P-ERK1/2的蛋白表達及活化情況。 3.研究慢性支氣管哮喘狀態(tài)下,HA含量、CD44蛋白表達與支氣管壁厚度(WA/Pi)、支氣管壁平滑肌厚度(S/Pi)、支氣管壁平滑肌細胞核數(shù)量(N/Pi)及ERK1/2、P-ERK1/2蛋白表達的相關(guān)性。 4.探討HA及其受體CD44與氣道平滑肌細胞(airway smooth muscle cells ,ASMCs)異常增殖的可能關(guān)系。 材料與方法 建立慢性哮喘大鼠模型,觀察氣道重構(gòu)的組織學(xué)變化,應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測氣道中HA,CD44表達變化,ELISA法檢測肺組織和BALF中HA的含量,熒光標(biāo)記聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis of fluorophore- labeled saccharides , PAGEFS)檢測肺組織中HA的含量,Western-blot檢測氣道中CD44,ERK1/2及P-ERK1/2蛋白的表達。 結(jié)果. 1.慢性哮喘組大鼠氣道出現(xiàn)明顯的病理變化:氣道壁及氣道平滑肌明顯增厚、細胞外基質(zhì)沉積、上皮下纖維化、新生血管的形成、黏膜下及管壁可見大量嗜酸性粒細胞及其他炎癥細胞浸潤。慢性哮喘組支氣管壁厚度( WA/Pi )(13.23±1.30)顯著高于對照組(9.43±1.42)(n=10,P0.01);支氣管壁平滑肌厚度(S/Pi) (4.47±0.77)顯著高于對照組(3.55±0.70)(n=10,P0.05);支氣管壁平滑肌細胞核數(shù)( N/Pi )( 0.0435±0.0121 )顯著高于對照組(0.0303±0.0070)(n=10,P 0.01)。 2.慢性哮喘大鼠氣道上皮下及平滑肌肌束周圍HA沉積較正常對照組明顯增加。肺組織HA含量(9.16±0.78)明顯高于對照組(7.05±0.70)(n=10,P 0.01); BLAF中HA含量(7.64±1.05)亦明顯高于對照組( 6.63±0.96()n=10,P0.05)。 3.慢性哮喘大鼠氣道CD44的表達(14.39±1.26)明顯高于對照組(9.50±1.20)(n=10,P 0.01)。 4.慢性哮喘大鼠氣道中ERK1/2蛋白表達(2.38±0.28)明顯高于對照組(2.03±0.34)(n=10,P 0.05);慢性哮喘大鼠氣道中P-ERK1/2蛋白表達(0.62±0.12)明顯高于對照組(0.46±0.10)(n=10,P0.01);慢性哮喘大鼠氣道中P-ERK1/2與ERK1/2的比值(0.26±0.03)明顯高于對照組(0.23±0.03)(n=10,P0.05)。5.肺組織HA含量與支氣管壁厚度(WA/Pi)、支氣管壁平滑肌厚度(S/ Pi)、支氣管壁平滑肌細胞核數(shù)量(N/ Pi)呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.770、0.700、0.870,對應(yīng)p值分別為p0.01、p0.05、p0.01);CD44蛋白表達與支氣管壁厚度(WA/Pi)、支氣管壁平滑肌厚度(S/ Pi)、支氣管壁平滑肌細胞核數(shù)量(N/ Pi)呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.692、0.673、0.817,對應(yīng)p值分別為p 0.05、p0.05、p0.01);肺組織HA含量與ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表達呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.754、0.824,p值分別為p0.05、p0.01);CD44蛋白表達與ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表達呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.752、0.809,p值分別為p0.05、p0.01 )。 結(jié)論 慢性哮喘氣道中細胞外基質(zhì)成分(extracellular matrix ,ECM)HA及其受體CD44的表達較正常組明顯增高,ERK1/2、P-ERK1/2表達及活性亦顯著上調(diào),HA與其受體CD44與氣道重構(gòu)相關(guān)指標(biāo)、ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表達均密切相關(guān)。提示哮喘狀態(tài)下,HA與其受體CD44可能通過ERK1/2信號通道促進哮喘ASMCs的異常增殖而參與慢性哮喘氣道重構(gòu)過程。
【學(xué)位單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R562.25
【部分圖文】：

圖 1：正常組支氣管平滑肌（×100）；圖 2：慢性哮喘組支氣管平滑�。�×100）Fig 1：The bronchial smooth muscle in control group ( ×100）, Fig 2：The bronchial smooth muscle in chronicasthmatic group（×100）.圖 3：正常大鼠氣道少量 HA 表達（×100）；圖 4：慢性哮喘大鼠氣道 HA 表達較對照組明顯增加

圖 1：正常組支氣管平滑�。�×100）；圖 2：慢性哮喘組支氣管平滑�。�×100）Fig 1：The bronchial smooth muscle in control group ( ×100）, Fig 2：The bronchial smooth muscle in chronicasthmatic group（×100）.圖 3：正常大鼠氣道少量 HA 表達（×100）；圖 4：慢性哮喘大鼠氣道 HA 表達較對照組明顯增加

25圖 3：正常大鼠氣道少量 HA 表達（×100）；圖 4：慢性哮喘大鼠氣道 HA 表達較對照組明顯增加（×100）Fig 3：There were little expression of HA in airways of control rats ( ×100）, , Fig 4：There were significantly higherexpression of HA in airways of chronic asthmatic rats than control rats ( ×100）,

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 宋立強,李妍,李毅,戚好文;細胞外基質(zhì)對氣道平滑肌細胞增殖活性的促進作用及其機制[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年06期

本文編號：2832325