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HA及其受體CD44在慢性哮喘模型大鼠氣道重構(gòu)中作用的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-10-02 10:56
   目的 1.研究慢性支氣管哮喘狀態(tài)下,大鼠肺組織中透明質(zhì)酸(hyaluronan ,HA)的表達(dá),大鼠支氣管肺泡灌洗液中(brochoalveolar lavage fluid ,BALF)HA的含量,大鼠氣道中CD44蛋白的表達(dá)。 2.研究慢性支氣管哮喘狀態(tài)下,大鼠氣道中細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)1/2和P-ERK1/2的蛋白表達(dá)及活化情況。 3.研究慢性支氣管哮喘狀態(tài)下,HA含量、CD44蛋白表達(dá)與支氣管壁厚度(WA/Pi)、支氣管壁平滑肌厚度(S/Pi)、支氣管壁平滑肌細(xì)胞核數(shù)量(N/Pi)及ERK1/2、P-ERK1/2蛋白表達(dá)的相關(guān)性。 4.探討HA及其受體CD44與氣道平滑肌細(xì)胞(airway smooth muscle cells ,ASMCs)異常增殖的可能關(guān)系。 材料與方法 建立慢性哮喘大鼠模型,觀察氣道重構(gòu)的組織學(xué)變化,應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測(cè)氣道中HA,CD44表達(dá)變化,ELISA法檢測(cè)肺組織和BALF中HA的含量,熒光標(biāo)記聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis of fluorophore- labeled saccharides , PAGEFS)檢測(cè)肺組織中HA的含量,Western-blot檢測(cè)氣道中CD44,ERK1/2及P-ERK1/2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果. 1.慢性哮喘組大鼠氣道出現(xiàn)明顯的病理變化:氣道壁及氣道平滑肌明顯增厚、細(xì)胞外基質(zhì)沉積、上皮下纖維化、新生血管的形成、黏膜下及管壁可見大量嗜酸性粒細(xì)胞及其他炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。慢性哮喘組支氣管壁厚度( WA/Pi )(13.23±1.30)顯著高于對(duì)照組(9.43±1.42)(n=10,P0.01);支氣管壁平滑肌厚度(S/Pi) (4.47±0.77)顯著高于對(duì)照組(3.55±0.70)(n=10,P0.05);支氣管壁平滑肌細(xì)胞核數(shù)( N/Pi )( 0.0435±0.0121 )顯著高于對(duì)照組(0.0303±0.0070)(n=10,P 0.01)。 2.慢性哮喘大鼠氣道上皮下及平滑肌肌束周圍HA沉積較正常對(duì)照組明顯增加。肺組織HA含量(9.16±0.78)明顯高于對(duì)照組(7.05±0.70)(n=10,P 0.01); BLAF中HA含量(7.64±1.05)亦明顯高于對(duì)照組( 6.63±0.96()n=10,P0.05)。 3.慢性哮喘大鼠氣道CD44的表達(dá)(14.39±1.26)明顯高于對(duì)照組(9.50±1.20)(n=10,P 0.01)。 4.慢性哮喘大鼠氣道中ERK1/2蛋白表達(dá)(2.38±0.28)明顯高于對(duì)照組(2.03±0.34)(n=10,P 0.05);慢性哮喘大鼠氣道中P-ERK1/2蛋白表達(dá)(0.62±0.12)明顯高于對(duì)照組(0.46±0.10)(n=10,P0.01);慢性哮喘大鼠氣道中P-ERK1/2與ERK1/2的比值(0.26±0.03)明顯高于對(duì)照組(0.23±0.03)(n=10,P0.05)。5.肺組織HA含量與支氣管壁厚度(WA/Pi)、支氣管壁平滑肌厚度(S/ Pi)、支氣管壁平滑肌細(xì)胞核數(shù)量(N/ Pi)呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.770、0.700、0.870,對(duì)應(yīng)p值分別為p0.01、p0.05、p0.01);CD44蛋白表達(dá)與支氣管壁厚度(WA/Pi)、支氣管壁平滑肌厚度(S/ Pi)、支氣管壁平滑肌細(xì)胞核數(shù)量(N/ Pi)呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.692、0.673、0.817,對(duì)應(yīng)p值分別為p 0.05、p0.05、p0.01);肺組織HA含量與ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.754、0.824,p值分別為p0.05、p0.01);CD44蛋白表達(dá)與ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.752、0.809,p值分別為p0.05、p0.01 )。 結(jié)論 慢性哮喘氣道中細(xì)胞外基質(zhì)成分(extracellular matrix ,ECM)HA及其受體CD44的表達(dá)較正常組明顯增高,ERK1/2、P-ERK1/2表達(dá)及活性亦顯著上調(diào),HA與其受體CD44與氣道重構(gòu)相關(guān)指標(biāo)、ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表達(dá)均密切相關(guān)。提示哮喘狀態(tài)下,HA與其受體CD44可能通過ERK1/2信號(hào)通道促進(jìn)哮喘ASMCs的異常增殖而參與慢性哮喘氣道重構(gòu)過程。
【學(xué)位單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2011
【中圖分類】:R562.25
【部分圖文】:

氣道,大鼠,對(duì)照組


圖 1:正常組支氣管平滑。×100);圖 2:慢性哮喘組支氣管平滑。×100)Fig 1:The bronchial smooth muscle in control group ( ×100), Fig 2:The bronchial smooth muscle in chronicasthmatic group(×100).圖 3:正常大鼠氣道少量 HA 表達(dá)(×100);圖 4:慢性哮喘大鼠氣道 HA 表達(dá)較對(duì)照組明顯增加

氣道,大鼠,對(duì)照組


圖 1:正常組支氣管平滑。×100);圖 2:慢性哮喘組支氣管平滑。×100)Fig 1:The bronchial smooth muscle in control group ( ×100), Fig 2:The bronchial smooth muscle in chronicasthmatic group(×100).圖 3:正常大鼠氣道少量 HA 表達(dá)(×100);圖 4:慢性哮喘大鼠氣道 HA 表達(dá)較對(duì)照組明顯增加

氣道,大鼠,對(duì)照組


25圖 3:正常大鼠氣道少量 HA 表達(dá)(×100);圖 4:慢性哮喘大鼠氣道 HA 表達(dá)較對(duì)照組明顯增加(×100)Fig 3:There were little expression of HA in airways of control rats ( ×100), , Fig 4:There were significantly higherexpression of HA in airways of chronic asthmatic rats than control rats ( ×100),

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 宋立強(qiáng),李妍,李毅,戚好文;細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞增殖活性的促進(jìn)作用及其機(jī)制[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年06期



本文編號(hào):2832325

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