【摘要】：目的:觀察劑量不同的氧化苦參堿(Oxymatrine,Oxy)藥物對(duì)哮喘大鼠的作用,探討氧化苦參堿治療哮喘的作用機(jī)制。方法:40只清潔級(jí)、雌性、健康的SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分成5組,每組8只。A組(哮喘組):第1、8天用新鮮配制的卵蛋白(Ovalbumin,OVA)/Al(OH)3懸濁液行腹腔注射致敏,15d-21d5%的OVA霧化液霧化激發(fā),每天60min。B組(低劑量組):致敏、激化方式同A組,15d-21d霧化前30分鐘,Oxy 50 mg/kg腹腔注射。C組(中劑量組):致敏、激化方式同A組,15d-21d霧化前30分鐘,Oxy 100 mg/kg腹腔注射。D組(高劑量組):致敏、激化方式同A組,15d-21d霧化前30分鐘,Oxy 150 mg/kg腹腔注射。E組(對(duì)照組):第1d、8d腹腔注射1ml 0.9%生理鹽水。15d-21d0.9%生理鹽水進(jìn)行霧化,每天60min,15d-21d霧化前30分鐘0.9%生理鹽水0.5ml/鼠/次腹腔注射。實(shí)驗(yàn)過程中,觀察大鼠活動(dòng)、飲食、呼吸等生活情況,末次激發(fā)24 h后處死全部大鼠,取大鼠肺臟,HE染色觀察肺組織病理改變,采用免疫組化、RT-PCR、Western Blot測(cè)定各組肺組織中IL-10、IL-17、CTLA-4基因及蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果:1、各組實(shí)驗(yàn)大鼠致敏激發(fā)后生活狀態(tài)哮喘組大鼠逐漸出現(xiàn)易激惹、搔抓、呼吸頻率增快、喜蜷伏、食欲減退,部分大鼠出現(xiàn)毛發(fā)脫落、行動(dòng)遲緩、皮膚紫紺,重者可聞哮鳴音。予以O(shè)xy干預(yù)的各組大鼠也出現(xiàn)哮喘組情況,但癥狀減輕,中、高劑量Oxy干預(yù)組癥狀減輕更為明顯。對(duì)照組大鼠活動(dòng)、進(jìn)食、呼吸等情況未見異常。2、各組實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織的改變肺組織HE染色結(jié)果顯示,正常對(duì)照組大鼠肺組織氣管直徑正常,未見炎癥細(xì)胞浸潤;哮喘組大鼠肺組織氣管直徑減小,管壁增厚,周圍大量炎癥細(xì)胞浸潤,氣道上皮倒伏,管腔分泌物增多。經(jīng)Oxy干預(yù)后,氣道狹窄及炎癥細(xì)胞侵入情況較哮喘組改善,且病變改善程度與氧化苦參堿用藥劑量呈正比。3、各組實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織IL-10、CTLA-4、IL-17的表達(dá)免疫組化檢測(cè)肺組織IL-10、CTLA-4的表達(dá):哮喘組IL-10與CTLA-4表達(dá)最低,對(duì)照組IL-10與CTLA-4表達(dá)最高,兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Oxy干預(yù)組隨藥物劑量增加IL-10與CTLA-4的表達(dá)逐漸增加,其中高劑量組與對(duì)照組比較差異無顯著性(P0.05)。免疫組化檢測(cè)肺組織IL-17的表達(dá):哮喘組IL-17表達(dá)最高,對(duì)照組IL-17表達(dá)最低,兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Oxy干預(yù)組隨藥物劑量增加IL-17表達(dá)逐漸減弱,其中高劑量組與對(duì)照組比較差異無顯著性(P0.05)。4、各組實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織IL-10、CTLA-4、IL-17 m RNA的表達(dá)肺組織IL-10、CTLA-4 m RNA的表達(dá):哮喘組IL-10與CTLA-4m RNA表達(dá)最低,對(duì)照組IL-10與CTLA-4 m RNA表達(dá)最高,兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Oxy干預(yù)組隨藥物劑量增加表達(dá)逐漸增加,其中高劑量組與對(duì)照組比較差異無顯著性(P0.05)。肺組織IL-17 m RNA的表達(dá):哮喘組IL-17 m RNA表達(dá)最高,對(duì)照組IL-17 m RNA表達(dá)最低,兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Oxy干預(yù)組隨藥物劑量增加表達(dá)逐漸減弱,其中高劑量組與對(duì)照組比較差異無顯著性(P0.05)。5、各組實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織IL-10、CTLA-4、IL-17蛋白水平的表達(dá)肺組織IL-10、CTLA-4蛋白的表達(dá):哮喘組IL-10與CTLA-4蛋白表達(dá)最低,對(duì)照組IL-10與CTLA-4蛋白表達(dá)最高,兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Oxy干預(yù)組隨藥物劑量增加表達(dá)逐漸增強(qiáng),其中高劑量組與對(duì)照組比較差異無顯著性(P0.05)。肺組織IL-17蛋白的表達(dá):各組中哮喘組IL-17蛋白表達(dá)最高,對(duì)照組IL-17蛋白表達(dá)最低,兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。予以O(shè)xy干預(yù)組隨藥物劑量增加表達(dá)逐漸減弱,其中高劑量組與對(duì)照組比較差異無顯著性(P0.05)。結(jié)論:1.氧化苦參堿有改善哮喘大鼠癥狀、抑制其肺組織炎癥反應(yīng)的作用。2.氧化苦參堿對(duì)哮喘大鼠抑制作用的機(jī)制可能與促進(jìn)肺組織IL-10、CTLA-4的表達(dá)及抑制肺組織IL-17的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R562.25

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張煒;崔曼麗;鄔磊;黃耀輝;曾鳴;陳茗;;雷公藤多苷片治療支氣管哮喘的臨床研究[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2016年01期

2 王天s

本文編號(hào)：2797365