【摘要】： 目的：氣道上皮是肺部抵御外界理化因素刺激的第一道防線。病原微生物、外界有害的微塵顆粒、氣體等因素導致氣道上皮損傷是慢性阻塞性肺疾病(COPD)的起始環(huán)節(jié)和病理基礎。吸煙是引起COPD的重要危險因素。吸煙與MMP-9、IL-8引起COPD的關系日益受到重視。分泌性白細胞蛋白酶抑制物(SLPI)是氣道重要的保護基質(zhì)。通過本實驗來檢測香煙煙霧提取物(CSE)對正常人支氣管上皮(NHBE)細胞MMP-9和IL-8表達水平的影響；并觀測加入SLPI對上述因素的調(diào)控作用。探討SLPI對慢性氣道炎癥疾病保護作用的部分機制，為COPD的臨床治療尋求更多的實驗依據(jù)。 方法：實驗分四組：對照組，CSE組，SLPI組，SLPI+CSE組。體外培育NHBE細胞分別給予CSE及SLPI干預處理，采用ELISA法檢測NHBE細胞上清液IL-8的表達；免疫細胞化學方法(SP法)檢測NHBE細胞MMP-9蛋白的表達及RT-PCR法和圖像分析檢測NHBE細胞MMP-9mRNA的表達。 結果：1對照組NHBE細胞有少量MMP-9、IL-8的表達。2 CSE組MMP-9、IL-8的表達明顯高于對照組、SLPI+CSE組、SLPI組。CSE干預NHBE細胞不同時間證實，其誘導MMP-9、IL-8表達的作用在一定范圍內(nèi)與干預時間呈依賴關系，24小時達高峰，隨后呈下降趨勢(P＜0.05)。3 SLPI組MMP-9、IL-8的表達水平明顯低于對照組(P＜0.05)。SLPI抑制MMP-9、IL-8表達的效應在一定范圍內(nèi)與濃度呈依賴關系，以10ug／ml的濃度抑制作用最強(P＜0.05)。4 SLPI+CSE組MMP-9、IL-8表達較對照組上調(diào)但低于CSE組的表達水平。 結論：1 CSE誘導NHBE細胞MMP-9、IL-8的表達上調(diào)。2SLPI抑制NHBE細胞MMP-9、IL-8的表達。3 SLPI能抑制CSE誘導NHBE細胞中MMP-9、IL-8的表達。
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R563.9
【圖文】：

組差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)。可見隨著SLPI作用濃度的增大其上清液IL一8的表達隨之降低，以SLPllo陀位d濃度時上清液IL一8的表達最低;提示SLPI可抑制NHBE細胞上清液IL一8的表達。(見表3一2，圖3一20)表3一 2sLPI不同作用濃度對NHBE細胞上清液IL一8的表達影響(義士S)sLpl(瑰/ml)對照組 0.01 0.1IL一8(Pg/ml)10.04.70士0.41 3.65士0.56* 2.55士0.22*令 1.52士0.07*.△0·73士 0.05*.△▲，_、_~，_，_二~.*，____二，。，_，_二____O_汪:與盯照組相比料<U.ul;與u.ol卜g/ml組相比F<U.ol，F(xiàn)<0.U爾與0.1瑰/ml組相比△ P<0.01:與1.0瑰蒯組相比▲P<0.05。

本文編號：2727231