【摘要】：目的:探討急性肺損傷早期肺泡灌洗液(肺泡灌洗液)中肺泡表面活性物質(zhì)蛋白SP-A、B、C、D及相關(guān)炎癥因子TNF-a、IL-32的變化趨勢(shì)及相關(guān)性。方法:(1)將成年新西蘭兔36只隨機(jī)分為正常無損傷對(duì)照組(n=6)和急性胸外傷肺損傷組(n=30),并將急性胸外傷肺損傷組實(shí)驗(yàn)兔全麻,實(shí)行氣管插管并連接呼吸機(jī)輔助通氣,控制兔處于屏氣狀態(tài)后,燒斷連接實(shí)驗(yàn)兔上方1.5m處、重35.g鐵錘的固定線,使其精準(zhǔn)的撞擊兔右胸腋中線的第4、5、6肋處,用床邊X線C臂機(jī)投射胸片,確認(rèn)無肋骨骨折、血?dú)庑氐雀蓴_因素后,建立急性肺損傷動(dòng)物模型。(2)于實(shí)驗(yàn)開始后的1、2、3、4、8及12h分別經(jīng)無損傷對(duì)照組、急性胸外傷肺損傷組兔頸靜脈取血,離心機(jī)離心處理后取上清液存放于-70℃冰箱中。然后立即處死實(shí)驗(yàn)兔,解剖胸腔,完整取出右肺,沿右主支氣管注入4℃生理鹽水,每次20ml,共三次,收集肺泡灌洗液置于-70℃冰箱中保存待測SP-A、B、C、D、TNF-a及IL-32含量。并分別在急性肺損傷兔的肺組織中留取損傷肺組織及正常組織,待做病理檢測。(3)以雙抗夾心ELISA法分別檢測實(shí)驗(yàn)后1、2、3、4、8及12h是血清及肺泡灌洗液中TNF-a及IL-32含量。以western方法檢測肺泡灌洗液中的SP-A、B、C、D的含量。將將取得的肺組織標(biāo)本經(jīng)醋酸鈾、硝酸鉛雙重染色后,置于投射電鏡下觀察肺泡組織的病理變化。結(jié)果:損傷組與對(duì)照組比較,肺損傷組肺泡組織有明顯的損傷、水腫、出血及炎癥反應(yīng)。肺損傷組肺泡灌洗液中SP-A、B、C、D在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的含量明顯低于對(duì)照組(p0.05)。血清及肺泡灌洗液中TNF-a、IL-32在損傷早期即可明顯升高(p0.05)。肺損傷后肺泡灌洗液中SP-A的含量與TNF-a含量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.122,p=0.03);SP-A、D與IL-32含量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.192,p=0.01;r=-0.077,p=0.01);血清中TNF-a與IL-32h含量呈正相關(guān)(r=1.163,p=0.01)。結(jié)論:急性肺損傷早期血清及肺泡灌洗液中TNF-a、IL-32含量顯著上升與肺損傷時(shí)肺組織結(jié)構(gòu)改變相符合,肺泡灌洗液中SP-A、B、C、D均呈下降趨勢(shì),其中SP-A與肺泡灌洗液中TNF-a含量呈負(fù)相關(guān),SP-A、D與IL-32含量水平呈負(fù)相關(guān),血清中TNF-a與IL-32呈正相關(guān),由此可推測SP蛋白在肺損傷早期可對(duì)炎癥因子TNF-a、IL-32的表達(dá)產(chǎn)生負(fù)調(diào)控作用。
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R563
【圖文】：

4.電鏡下急性肺損傷后病理學(xué)檢查電鏡下急性肺損傷后 1h 損傷部位肺泡細(xì)胞已有損害，肺泡及毛細(xì)血管充水腫，肺組織內(nèi)可見紅細(xì)胞浸潤（圖 3），損傷后 4h 肺泡腔充血水腫加重，見大量白細(xì)胞浸潤（圖 4），8h 后損傷肺泡內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞，肺泡細(xì)胞傷進(jìn)一步加重，細(xì)胞器腫脹，細(xì)胞核縮�。▓D 5），12h 后損傷肺泡壁破壞重，肺泡塌陷，可見肺泡腔內(nèi)出血，組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重受損（圖 6）。

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本文編號(hào)：2726487