發(fā)布時(shí)間：2020-06-20 03:39

【摘要】：急性肺損傷(acute lung injury，ALI)是指由各種肺內(nèi)外致病因素所導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性呼吸衰竭，是常見(jiàn)且難治的臨床急性危重癥。肺泡-毛細(xì)血管的損傷是ALI的發(fā)病基礎(chǔ)，微血管內(nèi)皮細(xì)胞作為血管內(nèi)外物質(zhì)交換的一道重要屏障，是循環(huán)血流剪切力和血中危險(xiǎn)因素的主要靶目標(biāo)，因而最容易并且最早受到傷害。新近研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)的pH(intracellular pH，pH_i)和Ⅰ型Na~+／H~+交換器(sodium-hydrogen exchanger isoform 1，NHE1)的活性改變?cè)趦?nèi)皮細(xì)胞的損傷中起著重要作用。NHE1是存在于質(zhì)膜上的一種蛋白質(zhì)，它參與細(xì)胞內(nèi)外的Na~+／H~+交換，在維持細(xì)胞的水、電解質(zhì)、酸堿平衡和細(xì)胞容積等方面發(fā)揮著重要作用。心房鈉尿肽(atrial natriureticpeptide，ANP)是一種含28個(gè)氨基酸的活性多肽，具有較強(qiáng)的擴(kuò)血管、利鈉、利尿等作用。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)ANP對(duì)ALI有良好療效，但機(jī)理不清。本實(shí)驗(yàn)利用LPS復(fù)制大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(pulmonary microvascularendothelial cells，PMVECs)損傷模型，以NHE1抑制劑——環(huán)己阿米洛利(5-(N，N-hexamethylene)-amiloride，HMA)為工具，探討：1)NHE1在LPS引起的大鼠PMVECs損傷中的作用；2)ANP對(duì)LPS引起的大鼠PMVECs損傷的治療作用；3)ANP是否通過(guò)抑制NHE1減輕LPS引起大鼠PMVECs損傷。 方法： 培養(yǎng)大鼠PMVECs，分為①對(duì)照組(control)；②LPS組(1mg.L~(-1))；③HMA或ANP治療組。比色法測(cè)定大鼠PMVECs上清液中的MDA和LDH；MTT試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞活力；流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞的細(xì)胞周期；利用BECEF-AM熒光探針染色細(xì)胞，激光共聚焦顯微鏡下觀察pH_i，檢測(cè)NHE1活性變化；RT-PCR技術(shù)分析NHE1的mRNA表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R563.8

【參考文獻(xiàn)】

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1 簡(jiǎn)文,戚好文,李志超;山莨菪堿、ANP和CGRP對(duì)油酸型急性肺損傷家兔的治療作用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年01期

2 廖秀玉,林建東,劉寧,陳小莉,王先奉,林松元;鈉氫交換體及其抑制物在急性肺損傷中的作用[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2000年11期

本文編號(hào)：2721810