蘿卜硫素和N-乙酰半胱氨酸對(duì)香煙煙霧提取物刺激后的肺泡上皮細(xì)胞的保護(hù)作用及其與IGFBP-3的關(guān)系
本文關(guān)鍵詞:蘿卜硫素和N-乙酰半胱氨酸對(duì)香煙煙霧提取物刺激后的肺泡上皮細(xì)胞的保護(hù)作用及其與IGFBP-3的關(guān)系,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:觀察蘿卜硫素(Sulforaphane,SFN)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-cysteine,NAC)對(duì)香煙煙霧提取物(Cigarette smoke extract,CSE)所致的A549細(xì)胞損傷是否具有保護(hù)作用,是否引起胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3(Insulin-like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)的表達(dá)水平變化,從而進(jìn)一步揭示上述損傷與保護(hù)的機(jī)制。 方法:將A549細(xì)胞分為四組,分別為未經(jīng)任何處理的對(duì)照組(Control),20%CSE處理組(20%CSE),5μM SFN預(yù)處理+20%CSE處理組,1mM NAC+20%CSE處理組。使用MTT比色法,分別測(cè)算各組細(xì)胞的存活率。利用流式細(xì)胞術(shù),熒光染色和AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記染色,分別計(jì)算各組細(xì)胞的周期阻滯情況和凋亡情況。使用活性氧熒光探針(DCFH-DA),測(cè)定各組細(xì)胞內(nèi)的活性氧簇(ROS)變化。最后,利用RT-qPCR技術(shù)和Western Bolt技術(shù)分析各組IGFBP-3表達(dá)水平的變化。 結(jié)果:20%CSE處理后,細(xì)胞的存活率明顯下降,SFN和NAC能在一定程度上拮抗CSE對(duì)細(xì)胞的影響。根據(jù)流式細(xì)胞術(shù)的分析,20%CSE可以使細(xì)胞周期阻滯在G1期,并增加其凋亡率,SFN和NAC可以有效地緩解CSE對(duì)細(xì)胞周期和生長(zhǎng)的影響,形態(tài)學(xué)表現(xiàn)也符合上述變化。除此之外,SFN和NAC可以抑制CSE暴露后細(xì)胞內(nèi)ROS水平。同時(shí),CSE作用后IGFBP-3在mRNA水平和蛋白水平都明顯增高,而在SFN和NAC處理后,IGFBP-3表達(dá)水平相比CSE處理組有所下降。 結(jié)論:CSE造成肺泡上皮細(xì)胞的損傷呈量效依賴關(guān)系,表現(xiàn)為細(xì)胞周期阻滯和凋亡率增高,SFN和NAC可以有效地緩解這種損傷,具有一定的保護(hù)作用。同時(shí)IGFBP-3的表達(dá)水平在上述過(guò)程中有明顯改變,提示IGFBP-3可能是參與CSE損傷下肺泡上皮細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)控的重要分子。
【關(guān)鍵詞】:香煙煙霧提取物 IGFBP-3 蘿卜硫素 N-乙酰半胱氨酸 肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R563;R96
【目錄】:
- 中文摘要3-4
- Abstract4-8
- 主要英文縮寫詞中英文對(duì)照表8-9
- 第一章 蘿卜硫素和N-乙酰半胱氨酸對(duì)香煙煙霧提取物刺激后肺泡上皮細(xì)胞的保護(hù)作用及其與IGFBP-3的關(guān)系9-35
- 1 引言9-10
- 2 材料和方法10-21
- 3 結(jié)果21-30
- 4 討論30-32
- 5 結(jié)論32
- 參考文獻(xiàn)32-35
- 第二章 香煙煙霧引起的氧化應(yīng)激在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞損傷中的作用(綜述)35-43
- 摘要35
- Abstract35
- 1 引言35-36
- 2 香煙煙霧引起的氧化應(yīng)激導(dǎo)致細(xì)胞損傷的始動(dòng)因素36
- 3 香煙煙霧引起的氧化應(yīng)激對(duì)AECⅡ的損傷作用以及相關(guān)機(jī)制36-39
- 4 結(jié)論和討論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-43
- 第三章 一種用于醫(yī)學(xué)研究的香煙煙霧提取物制備裝置的設(shè)計(jì)43-50
- 摘要43
- Abstract43-44
- 1 引言44
- 2 總體設(shè)計(jì)原理44-45
- 3 硬件設(shè)計(jì)及原理45-46
- 4 系統(tǒng)軟件設(shè)計(jì)46-49
- 5 在實(shí)驗(yàn)中的使用效果49
- 6 結(jié)束語(yǔ)49-50
- 參考文獻(xiàn)50
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):267841
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