發(fā)布時間：2017-03-22 22:02

  本文關(guān)鍵詞：矽肺發(fā)生發(fā)展過程中CC16和SP-D變化規(guī)律研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【研究目的】 探討CC16和SP-D在矽肺發(fā)生發(fā)展過程中變化及作用，為矽肺早期診斷和早期治療療效評估提供依據(jù)。 【研究方法】 1.動物實驗：選擇SPF級雄性Wistar大鼠84只，體重160-180克。隨機將大鼠分為對照組和染矽塵組，每組42只。染矽塵組采用非氣管暴露法1ml濃度為100mg/ml矽塵懸液一次性的氣管內(nèi)注入，對照組注入滅菌0.9%NaCl。染塵后分別在第3d、7d、14d、21d、28d、60d這6個時間點各取7只大鼠處死，進行在體支氣管肺泡灌洗，取肺組織和支氣管肺泡灌洗液（BALF,bronchoalveolarlavage fluid）。肺組織經(jīng)多聚甲醛固定后石蠟包埋，切片，并做HE染色及免疫組織化學(xué)實驗。觀察肺組織病理變化及免疫組化陽性表達結(jié)果。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定大鼠BALF中CC16，SP-D濃度變化并做統(tǒng)計分析。 2.人群研究：選取某金礦工人240名，其中Ⅰ期矽肺患者80人，Ⅱ期矽肺患者40人，接塵組80人，對照組40人。ELISA法檢測血清中CC16及SP-D含量并進行分析比較。 【研究結(jié)果】 1染塵大鼠肺組織病理學(xué)觀察 對照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整，未見明顯病變；染矽塵組大鼠染塵3d肺組織出現(xiàn)充血，炎性細(xì)胞（中性粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞）浸潤；7d充血明顯，肺泡間隔增寬且水腫，炎性細(xì)胞浸潤；14d肺泡間隔進一步增寬，大量巨噬細(xì)胞增生、聚集；21d肺泡腔萎縮，部分消失，肺泡間隔斷裂，炎性細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞；28d肺泡結(jié)構(gòu)大部分遭到破壞，成纖維細(xì)胞增生，膠原纖維增多，部分肺組織呈肺不張樣改變；60d肺泡結(jié)構(gòu)遭到嚴(yán)重破壞，肺廣泛纖維化。 2染塵大鼠肺組織免疫組化染色 對照組大鼠Clara細(xì)胞形態(tài)正常完整，排列整齊，Clara細(xì)胞的胞漿中大量表達CC16蛋白。染矽塵3d組，與對照組相比無明顯改變，Clara細(xì)胞胞漿內(nèi)仍然高表達CC16蛋白；7d組細(xì)支氣管Clara細(xì)胞受損，有少許細(xì)胞脫落；14d組細(xì)支氣管受損，Clara細(xì)胞大量脫落，CC16蛋白表達減少；21d時，CC16蛋白表達明顯減少，且Clara細(xì)胞受損加重，脫落明顯，呈現(xiàn)破損狀；28d組Clara細(xì)胞被成纖維細(xì)胞及膠原纖維細(xì)胞所取代；第60d時，CC16陽性表達極少，肺組織廣泛纖維化。 正常肺組織中的SP-D表達于肺泡Ⅱ型細(xì)胞和Clara細(xì)胞中，主要表達于肺泡Ⅱ型細(xì)胞。染矽塵組3d后，肺組織SP-D陽性細(xì)胞增多不明顯；7d組，肺泡Ⅱ型細(xì)胞SP-D陽性表達增多，肺泡結(jié)構(gòu)未有明顯改變；14d時，肺泡結(jié)構(gòu)遭到破壞，SP-D強陽性表達；21d時，SP-D表達減少，肺泡結(jié)構(gòu)遭到破壞；第28d時，肺泡結(jié)構(gòu)遭到大量破壞，SP-D陽性表達大量減少，細(xì)胞界限模糊；60d時，，肺泡Ⅱ型細(xì)胞受破壞嚴(yán)重，肺組織廣泛纖維化，SP-D陽性表達模糊不清。 3大鼠BALF中CC16，SP-D含量變化 染矽塵大鼠BALF中CC16含量在各時間點與對照組相比較，均有不同程度的降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），并且隨時間的延長，含量逐漸減少。 染矽塵大鼠BALF中SP-D含量在3d、7d、14d、21d時間點較對照組均有不同程度的升高，28d、60d較對照組降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），呈先增加后降低趨勢，在第14d時增高達高峰，此后開始降低。 4人血清中CC16，SP-D含量變化 與對照組相比，接塵組，矽肺Ⅰ期組、矽肺Ⅱ期組CC16及SP-D含量都明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），但接塵組、矽肺Ⅰ期組、矽肺Ⅱ期組之間CC16及SP-D含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 【研究結(jié)論】 1CC16和SP-D在矽塵引起的炎癥反應(yīng)過程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用，兩者量的表達與肺組織病理改變密切相關(guān)。 2矽塵誘導(dǎo)大鼠BALF和接塵工人血清中CC16含量的不斷降低，檢測CC16可反映矽肺早期肺組織中Clara細(xì)胞的損傷情況。 3染矽塵大鼠肺組織及BALF中SP-D表達增加，且其量隨時間延長而有規(guī)律變化；接塵人群血清中SP-D含量較對照組降低，提示檢測SP-D含量可反映矽肺早期發(fā)生發(fā)展過程中矽塵對肺泡Ⅱ型細(xì)胞及肺泡結(jié)構(gòu)的損傷程度。 4CC16和SP-D對矽肺的早期診斷及治療療效評估有一定的輔助意義。檢測兩者在血清中的含量可輔助判斷矽肺病情的嚴(yán)重程度。
【關(guān)鍵詞】：矽肺 二氧化硅 免疫組織化學(xué) CC16 SP-D
【學(xué)位授予單位】：濟南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R135.2
【目錄】：

• 研究生導(dǎo)師及課題指導(dǎo)小組成員簡介5-6
• 目錄6-8
• 中文摘要8-11
• ABSTRACT11-15
• 主要符號表15-16
• 前言16-21
• 技術(shù)路線21-22
• 第一部分 染矽塵大鼠 CC16、SP-D 變化的實驗研究22-39
• 材料與方法22-29
• 1 材料22-23
• 1.1 實驗動物22
• 1.2 主要試劑與儀器設(shè)備22-23
• 2 方法23-29
• 2.1 實驗試劑配制23-24
• 2.2 實驗動物分組24-25
• 2.3 實驗動物染矽塵模型建立25
• 2.4 支氣管肺泡灌洗液的收集25-26
• 2.5 大鼠 BALF 中 CC16、SP-D 測定26
• 2.6 大鼠肺組織病理學(xué)觀察及免疫組織化學(xué)測定26-28
• 2.7 統(tǒng)計學(xué)分析28-29
• 結(jié)果29-39
• 1 不同時間點大鼠肺組織標(biāo)本肉眼觀察29-30
• 2 大鼠肺組織切片 HE 染色30-32
• 3 大鼠肺組織免疫組織化學(xué)染色結(jié)果32-35
• 4 大鼠 BALF 中 CC16 含量變化35-37
• 5 大鼠 BALF 中 SP-D 含量變化37-39
• 第二部分 矽肺不同發(fā)展階段 CC16、SP-D 變化的現(xiàn)場研究39-44
• 對象與方法39-41
• 1 研究對象39
• 2 主要試劑與儀器設(shè)備39-40
• 3 方法40-41
• 3.1 問卷調(diào)查40
• 3.2 血樣收集40
• 3.3 血清 CC16、SP-D 測定40
• 3.4 統(tǒng)計學(xué)分析40-41
• 結(jié)果41-44
• 1 人群一般資料41
• 2 各觀察組血清中 CC16、SP-D 含量比較41-44
• 討論44-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻49-55
• 附表55-56
• 綜述56-64
• 參考文獻61-64
• 攻讀碩士期間已（待）發(fā)表論文64-65
• 致謝65

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關(guān)鍵詞：矽肺發(fā)生發(fā)展過程中CC16和SP-D變化規(guī)律研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：262276