本文關(guān)鍵詞：矽肺發(fā)生發(fā)展過(guò)程中CC16和SP-D變化規(guī)律研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【研究目的】 探討CC16和SP-D在矽肺發(fā)生發(fā)展過(guò)程中變化及作用，為矽肺早期診斷和早期治療療效評(píng)估提供依據(jù)。 【研究方法】 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：選擇SPF級(jí)雄性Wistar大鼠84只，體重160-180克。隨機(jī)將大鼠分為對(duì)照組和染矽塵組，每組42只。染矽塵組采用非氣管暴露法1ml濃度為100mg/ml矽塵懸液一次性的氣管內(nèi)注入，對(duì)照組注入滅菌0.9%NaCl。染塵后分別在第3d、7d、14d、21d、28d、60d這6個(gè)時(shí)間點(diǎn)各取7只大鼠處死，進(jìn)行在體支氣管肺泡灌洗，取肺組織和支氣管肺泡灌洗液（BALF,bronchoalveolarlavage fluid）。肺組織經(jīng)多聚甲醛固定后石蠟包埋，切片，并做HE染色及免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)。觀察肺組織病理變化及免疫組化陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定大鼠BALF中CC16，SP-D濃度變化并做統(tǒng)計(jì)分析。 2.人群研究：選取某金礦工人240名，其中Ⅰ期矽肺患者80人，Ⅱ期矽肺患者40人，接塵組80人，對(duì)照組40人。ELISA法檢測(cè)血清中CC16及SP-D含量并進(jìn)行分析比較。 【研究結(jié)果】 1染塵大鼠肺組織病理學(xué)觀察 對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整，未見(jiàn)明顯病變；染矽塵組大鼠染塵3d肺組織出現(xiàn)充血，炎性細(xì)胞（中性粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞）浸潤(rùn)；7d充血明顯，肺泡間隔增寬且水腫，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；14d肺泡間隔進(jìn)一步增寬，大量巨噬細(xì)胞增生、聚集；21d肺泡腔萎縮，部分消失，肺泡間隔斷裂，炎性細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞；28d肺泡結(jié)構(gòu)大部分遭到破壞，成纖維細(xì)胞增生，膠原纖維增多，部分肺組織呈肺不張樣改變；60d肺泡結(jié)構(gòu)遭到嚴(yán)重破壞，肺廣泛纖維化。 2染塵大鼠肺組織免疫組化染色 對(duì)照組大鼠Clara細(xì)胞形態(tài)正常完整，排列整齊，Clara細(xì)胞的胞漿中大量表達(dá)CC16蛋白。染矽塵3d組，與對(duì)照組相比無(wú)明顯改變，Clara細(xì)胞胞漿內(nèi)仍然高表達(dá)CC16蛋白；7d組細(xì)支氣管Clara細(xì)胞受損，有少許細(xì)胞脫落；14d組細(xì)支氣管受損，Clara細(xì)胞大量脫落，CC16蛋白表達(dá)減少；21d時(shí)，CC16蛋白表達(dá)明顯減少，且Clara細(xì)胞受損加重，脫落明顯，呈現(xiàn)破損狀；28d組Clara細(xì)胞被成纖維細(xì)胞及膠原纖維細(xì)胞所取代；第60d時(shí)，CC16陽(yáng)性表達(dá)極少，肺組織廣泛纖維化。 正常肺組織中的SP-D表達(dá)于肺泡Ⅱ型細(xì)胞和Clara細(xì)胞中，主要表達(dá)于肺泡Ⅱ型細(xì)胞。染矽塵組3d后，肺組織SP-D陽(yáng)性細(xì)胞增多不明顯；7d組，肺泡Ⅱ型細(xì)胞SP-D陽(yáng)性表達(dá)增多，肺泡結(jié)構(gòu)未有明顯改變；14d時(shí)，肺泡結(jié)構(gòu)遭到破壞，SP-D強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)；21d時(shí)，SP-D表達(dá)減少，肺泡結(jié)構(gòu)遭到破壞；第28d時(shí)，肺泡結(jié)構(gòu)遭到大量破壞，SP-D陽(yáng)性表達(dá)大量減少，細(xì)胞界限模糊；60d時(shí)，，肺泡Ⅱ型細(xì)胞受破壞嚴(yán)重，肺組織廣泛纖維化，SP-D陽(yáng)性表達(dá)模糊不清。 3大鼠BALF中CC16，SP-D含量變化 染矽塵大鼠BALF中CC16含量在各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組相比較，均有不同程度的降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），并且隨時(shí)間的延長(zhǎng)，含量逐漸減少。 染矽塵大鼠BALF中SP-D含量在3d、7d、14d、21d時(shí)間點(diǎn)較對(duì)照組均有不同程度的升高，28d、60d較對(duì)照組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），呈先增加后降低趨勢(shì)，在第14d時(shí)增高達(dá)高峰，此后開始降低。 4人血清中CC16，SP-D含量變化 與對(duì)照組相比，接塵組，矽肺Ⅰ期組、矽肺Ⅱ期組CC16及SP-D含量都明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），但接塵組、矽肺Ⅰ期組、矽肺Ⅱ期組之間CC16及SP-D含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 【研究結(jié)論】 1CC16和SP-D在矽塵引起的炎癥反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用，兩者量的表達(dá)與肺組織病理改變密切相關(guān)。 2矽塵誘導(dǎo)大鼠BALF和接塵工人血清中CC16含量的不斷降低，檢測(cè)CC16可反映矽肺早期肺組織中Clara細(xì)胞的損傷情況。 3染矽塵大鼠肺組織及BALF中SP-D表達(dá)增加，且其量隨時(shí)間延長(zhǎng)而有規(guī)律變化；接塵人群血清中SP-D含量較對(duì)照組降低，提示檢測(cè)SP-D含量可反映矽肺早期發(fā)生發(fā)展過(guò)程中矽塵對(duì)肺泡Ⅱ型細(xì)胞及肺泡結(jié)構(gòu)的損傷程度。 4CC16和SP-D對(duì)矽肺的早期診斷及治療療效評(píng)估有一定的輔助意義。檢測(cè)兩者在血清中的含量可輔助判斷矽肺病情的嚴(yán)重程度。
【關(guān)鍵詞】：矽肺 二氧化硅 免疫組織化學(xué) CC16 SP-D
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R135.2
【目錄】：

• 研究生導(dǎo)師及課題指導(dǎo)小組成員簡(jiǎn)介5-6
• 目錄6-8
• 中文摘要8-11
• ABSTRACT11-15
• 主要符號(hào)表15-16
• 前言16-21
• 技術(shù)路線21-22
• 第一部分 染矽塵大鼠 CC16、SP-D 變化的實(shí)驗(yàn)研究22-39
• 材料與方法22-29
• 1 材料22-23
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物22
• 1.2 主要試劑與儀器設(shè)備22-23
• 2 方法23-29
• 2.1 實(shí)驗(yàn)試劑配制23-24
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組24-25
• 2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染矽塵模型建立25
• 2.4 支氣管肺泡灌洗液的收集25-26
• 2.5 大鼠 BALF 中 CC16、SP-D 測(cè)定26
• 2.6 大鼠肺組織病理學(xué)觀察及免疫組織化學(xué)測(cè)定26-28
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28-29
• 結(jié)果29-39
• 1 不同時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織標(biāo)本肉眼觀察29-30
• 2 大鼠肺組織切片 HE 染色30-32
• 3 大鼠肺組織免疫組織化學(xué)染色結(jié)果32-35
• 4 大鼠 BALF 中 CC16 含量變化35-37
• 5 大鼠 BALF 中 SP-D 含量變化37-39
• 第二部分 矽肺不同發(fā)展階段 CC16、SP-D 變化的現(xiàn)場(chǎng)研究39-44
• 對(duì)象與方法39-41
• 1 研究對(duì)象39
• 2 主要試劑與儀器設(shè)備39-40
• 3 方法40-41
• 3.1 問(wèn)卷調(diào)查40
• 3.2 血樣收集40
• 3.3 血清 CC16、SP-D 測(cè)定40
• 3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析40-41
• 結(jié)果41-44
• 1 人群一般資料41
• 2 各觀察組血清中 CC16、SP-D 含量比較41-44
• 討論44-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-55
• 附表55-56
• 綜述56-64
• 參考文獻(xiàn)61-64
• 攻讀碩士期間已（待）發(fā)表論文64-65
• 致謝65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：262276